Anticorpo policlonale di coniglio anti-GGT1 per WB, IHC-P, ELISA - P19440

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di GGT1

• GGT1 viene sintetizzata come proenzima di 61 kDa (UniProt: 61410 Da), che viene processato in una catena pesante di 39 kDa e una catena leggera di 24 kDa, le quali si associano per formare l'enzima attivo.
• Catalizza la scissione del legame gamma-glutamilico del glutatione extracellulare (GSH) e dei coniugati del glutatione, rilasciando glutammato e cisteinil-glicina e regolando così l'omeostasi del glutatione e la disponibilità di cisteina. Riferimenti correlati: PMID:21447318, PMID:27791009
• GGT1 converte il leucotriene C4 (LTC4) in LTD4, una fase fondamentale nella sintesi dei leucotrieni cisteinilici, potenti mediatori pro-infiammatori. Riferimenti correlati: PMID:17924658, PMID:21447318, PMID:7673200
• L'enzima può inoltre catalizzare reazioni di transpeptidazione, trasferendo il gruppo gamma-glutamilico a dipeptidi o amminoacidi per formare nuovi composti gamma-glutamilici. Riferimenti correlati: PMID:17924658, PMID:21447318, PMID:7673200
• GGT1 è una proteina transmembrana di tipo II ancorata alla membrana plasmatica tramite un dominio segnale-ancora N-terminale, con il dominio catalitico esposto nello spazio extracellulare.
• La proteina è fortemente glicosilata e contiene modificazioni con acido sialico, fondamentali per il suo corretto ripiegamento, la stabilità e la funzione enzimatica.
• È altamente espressa nel rene e nel fegato, nonché nel pancreas, nello stomaco, nell'intestino, nella placenta e nei polmoni; l'uso alternativo dei promotori genera isoforme specifiche dei tessuti.
• Un'isoforma specifica del polmone sembra essere cataliticamente inattiva, suggerendo una regolazione funzionale dipendente dal tessuto.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è stato generato contro una proteina di fusione ricombinante corrispondente agli amminoacidi 370–569 di GGT1 umano (NP_038265.2), una regione localizzata nella catena leggera C-terminale. Questo design suggerisce che l'anticorpo possa rilevare la catena leggera di 24 kDa, il proenzima di 61 kDa e possibilmente la catena pesante di 39 kDa, a seconda del trattamento del campione e delle condizioni del gel.
• Per il western blot, i campioni di controllo positivo possono includere lisati di rene o fegato umano, che esprimono naturalmente livelli elevati di GGT1.
• Nelle applicazioni IHC-P, è prevedibile una colorazione della membrana plasmatica; potrebbe essere necessario ottimizzare le condizioni di recupero antigenico in base al tipo di tessuto e al metodo di fissazione.
• È stata riportata una reattività crociata di questo anticorpo con GGT1 di topo e ratto, ma gli utilizzatori devono validare indipendentemente la reattività specifica per specie e le condizioni del test.
• Data la natura multisubunità di GGT1, si consiglia di analizzare campioni ridotti e non ridotti per caratterizzare i pattern delle bande.

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