Anticorpo monoclonale di coniglio contro Gli3 per WB, IF/ICC, ELISA - P10071

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di GLI3

• GLI3 codifica per un fattore di trascrizione chiave della via di segnalazione Hedgehog, essenziale per la formazione del cervello, degli arti e di altre strutture corporee. Riferimenti correlati: PMID:10075717 PMID:10375510 PMID:10693759
• La proteina GLI3 a lunghezza intera (GLI3FL/GLI3-190, ~190 kDa) agisce come attivatore trascrizionale dopo l'attivazione di Smoothened (SMO), ma viene processato costitutivamente nella forma principale repressiva (GLI3R) in assenza di segnalazione Hedgehog. Riferimenti correlati: PMID:10375510 PMID:10693759
• GLI3 riconosce specificamente la sequenza consenso del DNA 5'-GACCACCCA-3' per regolare direttamente l'espressione dei geni target. Riferimenti correlati: PMID:10075717
• La proteina si localizza dinamicamente nel nucleo, nel citoplasma e nel ciglio primario, riflettendo il suo ruolo nella trasduzione del segnale.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione, metilazione e ubiquitinazione, che regolano finemente la sua stabilità e attività (parole chiave UniProt: Acetilazione, Fosfoproteina, Metilazione, Legame isopeptidico, Coniugazione Ubl).
• Le mutazioni in GLI3 sono associate a malattie dello sviluppo come la sindrome cefalopolissindattilia di Greig (GCPS) e la sindrome di Pallister-Hall (PHS) (UniProt: Variante di malattia).
• È espresso ampiamente nei tessuti adulti, inclusi polmone, colon, milza, placenta, testicolo e miometrio.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno (aa 1301–1580) si trova in una regione a valle dei domini a dito di zinco; se si studiano prodotti di scissione, verificare che l'epitopo sia presente sia nelle isoforme a lunghezza intera che in quelle processate.
• Per Western blot, il peso molecolare previsto è ~170 kDa; potrebbe essere necessaria un'elettroforesi e un trasferimento prolungati a causa delle grandi dimensioni della proteina.
• Validare l'anticorpo nel vostro sistema di campioni (umano, topo o ratto) utilizzando controlli positivi appropriati (ad esempio linee cellulari con espressione nota di GLI3 o attivazione della via Hedgehog).
• In immunofluorescenza/ICC, aspettarsi pattern di colorazione nucleare, citoplasmatica o ciliare a seconda dello stato della segnalazione.
• L'ELISA può essere utilizzata per la rilevazione quantitativa, ma le condizioni ottimali di rivestimento e rilevazione devono essere determinate empiricamente.

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