Anticorpo monoclonale coniglio contro Glutathione Peroxidase 2 per WB e ELISA - P18283

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Glutathione Peroxidase 2

• La Glutathione Peroxidase 2 (GPX2), conosciuta anche come perossidasi del glutatione gastrointestinale, GPx-GI, GSHPx-GI, GPRP-2 e perossidasi del glutatione dell'idroperossido fosfolipidico, è un membro della famiglia delle glutatione perossidasi che svolge principalmente una funzione di difesa antiossidante cellulare.
• La GPX2 catalizza la riduzione degli idroperossidi dipendente dal glutatione, tra cui H2O2, cumene idroperossido, tert-butil idroperossido e numerosi idroperossidi derivati da acidi grassi, regolando di conseguenza l'omeostasi redox cellulare; non riduce l'idroperossido di fosfatidilcolina. Riferimenti correlati: PMID:36608588 PMID:8428933
• La proteina si localizza nel citoplasma e nel citosol, in coerenza con il suo ruolo nella detossificazione intracellulare dei perossidi.
• L'espressione è tessuto-specifica, rilevata principalmente nel fegato e nel tratto gastrointestinale, mentre è assente nel cuore e nei reni, a conferma del suo ruolo specializzato nell'equilibrio redox del sistema digestivo.
• La GPX2 contiene un residuo di selenocisteina (Sec) nel sito attivo, essenziale per la sua attività perossidasica, codificato da un codone UGA ricodificato.
• In quanto membro del proteoma di riferimento con una struttura 3D nota, la GPX2 è un enzima ben caratterizzato nella ricerca sullo stress ossidativo e l'infiammazione, in particolare nelle patologie gastrointestinali.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione centrale (aa 70–174) della GPX2 umana, che evita domini transmembrana predetti o fortemente modificati; si consiglia di verificare la specificità dell'anticorpo utilizzando lisati cellulari che sovraesprimono GPX2 o mediante silenziamento con siRNA in una linea cellulare gastrointestinale appropriata.
• Per Western blot si consiglia l'utilizzo di un SDS-PAGE riducente; la dimensione della banda prevista è di circa 22 kDa, ma può subire leggeri spostamenti a causa di modifiche post-traduzionali o della preparazione del campione.
• Per ELISA, abbina questo anticorpo con un anticorpo di rilevamento corrispondente che riconosca un epitopo non sovrapposto; valida il test sandwich utilizzando GPX2 umana ricombinante o estratti di tessuto nativo.
• Poiché l'espressione di GPX2 è elevata nel fegato e nell'intestino, utilizza HepG2, Caco-2 o omogenati di tessuto come controlli positivi; lisati di cuore o rene possono essere utilizzati come controlli negativi.
• Ottimizza empiricamente la diluizione dell'anticorpo primario, partendo da 1:500 a 1:2000 per WB e 0,5-2 µg/mL per ELISA, e includi reagenti di rilevamento secondari appropriati.
• Non sono state riportate reattività crociate con altre glutatione perossidasi (ad esempio GPX1, GPX3), ma conferma la specificità nel tuo test analizzando membri ricombinanti della famiglia, se disponibili.

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