Anticorpo monoclonale di coniglio anti Glicogeno sintasi 1 (GYS1) per WB, ELISA - P13807

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Glicogeno sintasi 1 (GYS1)

• La Glicogeno sintasi 1 (GYS1), nota anche come glicogeno sintasi muscolare, è l'enzima chiave nella biosintesi del glicogeno, catalizzando il trasferimento di residui glucosilici dall'UDP-glucosio all'estremità non riducente degli inneschi alfa-1,4-glucano.
• Lavora in concerto con la glicogenina (che avvia l'innesco del glicogeno) e l'enzima di ramificazione del glicogeno per estendere e ramificare la molecola di glicogeno.
• GYS1 è espressa prevalentemente nel muscolo scheletrico, ma anche nella maggior parte dei tipi cellulari in cui il glicogeno funge da riserva di energia.
• L'enzima è soggetto a regolazione allosterica e fosforilazione reversibile, che modulano la sua attività in risposta all'insulina e ai segnali metabolici.
• Lo splicing alternativo del trascritto GYS1 produce multiple isoforme, che possono differire nelle proprietà regolatorie.
• Le mutazioni e la disregolazione di GYS1 sono implicate nei disturbi metabolici, inclusi il diabete mellito, come evidenziato dalle annotazioni delle varianti di malattia di UniProt.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• La sequenza immunogena (aa 638–737) si trova all'interno della regione C-terminale della GYS1 umana, un dominio conservato tra i mammiferi; si prevede quindi la reattività dell'anticorpo attraverso le specie umana, murina e del ratto.
• Per il Western blotting, utilizzare SDS-PAGE riducente e caricare 20–50 µg di proteina totale da lisati di muscolo scheletrico, fegato o linee cellulari note per esprimere GYS1. La dimensione prevista della banda è di circa 84 kDa.
• Quando si esegue un ELISA, considerare l'utilizzo di un formato a coppia di anticorpi se si sviluppa un test sandwich, e validare le prestazioni dell'anticorpo con la proteina ricombinante GYS1 o lisati cellulari per confermare sensibilità e specificità.
• Dato che GYS1 è una fosfoproteina, il trattamento dei campioni con inibitori delle fosfatasi potrebbe essere necessario per preservare gli stati di fosforilazione se questi sono obiettivi di interesse.

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