Anticorpo monoclonale di coniglio GNE per WB, ELISA - Q9Y223

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di GNE

• Il gene GNE codifica per un enzima bifunzionale con attività di UDP-N-acetilglucosamina 2-epimerasi e N-acetilmanosammina chinasi, che catalizza la fase limitante della velocità nella biosintesi degli acidi sialici (PubMed:10334995, PubMed:11326336, PubMed:14707127).
  Riferimenti bibliografici:
  PMID:10334995, PMID:11326336, PMID:14707127
• Gli acidi sialici sono zuccheri terminali caricati negativamente presenti sui glicoconiugati della superficie cellulare che mediano processi cellulari fondamentali, tra cui l'adesione, la trasduzione del segnale e il riconoscimento.
• L'enzima è localizzato nel citoplasma/citosol.
• L'impianto alternativo dell'RNA pre-messaggero genera molteplici isoforme con espressione tessuto-specifica: l'isoforma 1 è espressa in modo ubiquo, l'isoforma 2 si trova prevalentemente nella placenta e l'isoforma 3 è espressa a bassi livelli nel rene, nel fegato, nella placenta e nel colon.
• La massima espressione complessiva di GNE si osserva nel fegato e nella placenta, con un'ulteriore espressione nel cuore, nel cervello, nel polmone, nel rene, nel muscolo scheletrico e nel pancreas.
• GNE è un enzima allosterico e una fosfoproteina, che richiede il legame con lo ione zinco e l'ATP per la sua attività chinasi.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Il peptide immunogeno (aa 623-722) si trova nella regione C-terminale di GNE umano; l'allineamento di sequenza con GNE di ratto conferma la reattività incrociata dichiarata.
• Per il Western blotting, si consiglia l'utilizzo di SDS-PAGE denaturante standard e il trasferimento su membrana di PVDF o nitrocellulosa. Il peso molecolare previsto è di ~79 kDa, anche se le modifiche post-traduzionali possono causare leggeri spostamenti della banda.
• Per applicazioni ELISA, si consiglia il rivestimento con il peptide immunogeno o la proteina GNE ricombinante; validare le condizioni di saggi nella matrice di campione specifica del vostro esperimento.
• Se utilizzate questo anticorpo in studi funzionali, verificate che non interferisca con l'attività enzimatica di GNE, poiché è direzionato contro il dominio C-terminale.

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