Anticorpo policlonale coniglio GRHL2 per WB, ELISA - Q6ISB3

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di GRHL2

• GRHL2 (Grainyhead-like protein 2 homolog), noto anche come Brother of mammalian grainyhead (BOM) e Transcription factor CP2-like 3 (TFCP2L3), è un membro della famiglia dei fattori di trascrizione grainyhead-like che comprende GRHL1, GRHL2 e GRHL3.
• Svolge un ruolo fondamentale nella neurulazione primaria e nello sviluppo epiteliale agendo sia come attivatore che come repressore trascrizionale, legandosi alla sequenza consensus del DNA 5'-AACCGGTT-3'. Riferimenti correlati: PMID:25152456, PMID:29309642
• Collabora con GRHL3 per definire zone distinte di neurulazione primaria; è essenziale per la chiusura 3 (prosencefalo rostrale) e la chiusura del neuroporo posteriore.
• Regola la morfogenesi epiteliale upregolando le componenti delle giunzioni strette CLDN3 e CLDN4, e aumenta la localizzazione di CLDN4 alle giunzioni strette tramite RAB25.
• Nei cheratinociti, attiva la telomerasi legandosi al promotore TERT e inibendo la metilazione del DNA, probabilmente interferendo con l'attività di DNMT1. Riferimenti correlati: PMID:19015635, PMID:20938050
• Sopprime la differenziazione dei cheratinociti e la funzione epidermica inibendo epigeneticamente l'espressione dei geni del complesso di differenziazione epidermica (EDC), oltre a GRHL1 e GRHL3. Riferimenti correlati: PMID:23254293
• Si localizza nel nucleo e nella membrana. È altamente espresso nei cheratinociti, nella placenta, nella prostata, nel cervello, nel rene e in vari tessuti epiteliali tra cui polmone e coclea; viene rilevato anche nelle cellule epiteliali corneali. Riferimenti correlati: PMID:29499165
• Il gene subisce splicing alternativo, producendo isoforme proteiche con pesi molecolari calcolati di circa 69 kDa e 71 kDa, in linea con le bande osservate nel Western blot. Le mutazioni in GRHL2 sono associate a patologie come distrofia corneale, sordità e displasia ectodermica (parole chiave UniProt).

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 110–210 del GRHL2 umano, una regione che potrebbe essere conservata tra le specie; data la reattività incrociata riportata con uomo e ratto, se necessario va eseguita la validazione in altre specie (ad esempio il topo).
• Per il Western blotting, utilizzare lisati di cellule intere che esprimono GRHL2 come HaCaT (cheratinociti umani), tessuto placentare o linee cellulari di cancro alla prostata. Si prevede che l'anticorpo rilevi bande di circa 69 kDa e 71 kDa, corrispondenti alle due isoforme principali.
• Per l'ELISA, considerare il requisito dell'applicazione per il riconoscimento di proteine native rispetto a denaturate e includere controlli appropriati.
• Poiché l'anticorpo è un IgG policlonale di coniglio, gli anticorpi secondari standard anti-coniglio sono adatti; ottimizzare la diluizione dell'anticorpo primario per ogni sistema di analisi.

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