Anticorpo policlonale HEXA da coniglio per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P06865

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione HEXA

• HEXA codifica per la subunità alfa della beta-esosaminidasi, nota anche come subunità alfa della beta-N-acetilesosaminidasi. Forma gli isoenzimi esosaminidasi A (eterodimero αβ) ed S (omodimero αα).
• L'enzima idrolizza l'estremità non riducente N-acetil-D-esosamina e N-acetil-D-esosamina solfatata da glicoconiugati, incluse catene oligosaccaridiche, glicolipidi neutri e mucopolisaccaridi.
  Riferimenti correlati:
  PMID:11707436
  PMID:16698036
  PMID:8123671
• Gli isoenzimi S e A sono ugualmente attivi sui glicani bis-solfatati anionici, sul trisaccaride condroitin-6-solfato e sul pentasaccaride dermatan solfato, mentre l'isoenzima B non idrolizza questi substrati.
  Riferimenti correlati:
  PMID:11707436
• Solo l'isoenzima A è responsabile della degradazione dei gangliosidi GM2 in presenza della proteina attivatrice GM2A.
  Riferimenti correlati:
  PMID:8123671
  PMID:8672428
  PMID:9694901
• La proteina è localizzata nel lisosoma e svolge ruoli critici nel metabolismo dei glicoconiugati e dei lipidi.
• Le mutazioni in HEXA portano alla malattia di Tay-Sachs, una grave gangliosidosi neurodegenerativa caratterizzata dall'accumulo di GM2.
• Lo splicing alternativo genera multiple varianti di trascrizione; la proteina subisce modifiche post-traduzionali inclusa la glicosilazione e la formazione di legami disolfuro.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli aminoacidi 270–529 di HEXA umana, coprendo una vasta regione C-terminale. Questo design probabilmente riconosce sia la HEXA a lunghezza intera che potenziali isoforme alternative; verificare la specificità nel proprio sistema campione.
• Per il Western blot, è prevista una banda vicino a 61 kDa. Utilizzare controlli di caricamento appropriati e considerare condizioni riducenti per risolvere complessi legati da disolfuro. I lisati di fegato o cervello umano possono fungere da controlli positivi.
• Per IHC-P e IF-P, si suggerisce una fissazione standard con PFA al 4% e metodi di recupero dell'antigene (es. tampone citrato, pH 6.0). La reattività crociata con tessuti di topo e ratto consente l'analisi in modelli preclinici.
• Per ELISA, ottimizzare le condizioni di rivestimento utilizzando la proteina HEXA ricombinante. Per lo sviluppo di ELISA a sandwich, si raccomanda una coppia abbinata con un anticorpo di cattura mirato a un epitopo non sovrapposto.

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