Anticorpo policlonale coniglio HIF1β/ARNT per IF/ICC, ELISA - P27540

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di HIF1β/ARNT

• HIF1β/ARNT, noto anche come proteina 2 elica-ansa-elica di base di classe E (bHLHe2) o fattore inducibile dall'ipossia 1-beta (HIF-1-beta), è un fattore di trascrizione codificato dal gene ARNT.
• Funziona come partner obbligatorio per l'eterodimerizzazione di diverse proteine bHLH-PAS, incluso il recettore degli idrocarburi arilici (AHR), mediando la risposta allo xenobiotico legandosi agli elementi di risposta allo xenobiotico (XRE) o agli elementi di risposta alla diossina (DRE) nei promotori dei geni bersaglio. Riferimenti correlati: PMID:28396409, PMID:34521881
• ARNT eterodimerizza anche con le subunità alfa dei fattori inducibili dall'ipossia (HIF1A, EPAS1, NPAS1 o NPAS3) per formare fattori di trascrizione inducibili dall'ipossia che attivano geni coinvolti nelle risposte cellulari all'ipossia, inclusi angiogenesi, eritropoiesi e adattamento metabolico. Riferimenti correlati: PMID:16181639, PMID:20699359
• La proteina si localizza nel nucleo dove esercita la sua funzione di regolazione trascrizionale.
• ARNT subisce modificazioni post-traduzionali come acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione (legame isopeptidico/coniugazione ubl), che possono regolare la sua attività e stabilità.
• Lo splicing alternativo genera multiple isoforme, contribuendo alla diversità funzionale.
• Strutturalmente, ARNT contiene domini elica-ansa-elica di base (bHLH) e PER-ARNT-SIM (PAS) essenziali per il legame al DNA e l'eterodimerizzazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione C-terminale (aa 465-570) di HIF1β/ARNT umano; considerare la verifica della specificità dell'isoforma utilizzando controlli appropriati.
• Per IF/ICC, l'ARNT localizzato nel nucleo potrebbe richiedere una permeabilizzazione e fissazione ottimizzate; includere una controcolorazione nucleare per confermare la localizzazione.
• Nell'ELISA, diluire e validare l'anticorpo utilizzando campioni positivi e negativi noti di umano, mouse o ratto per valutare la reattività crociata e la linearità del segnale.
• Come reagente policlonale, prevedere variazioni tra lotti e includere standard di riferimento in ogni esperimento.
• L'induzione dell'espressione di ARNT con mimetici dell'ipossia (es. CoCl₂) potrebbe migliorare il rilevamento negli assay basati su cellule.

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