mAb di coniglio contro IgE umana per WB, FC, ELISA - P01854

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione delle IgE

• Le IgE sono una regione costante epsilon della catena pesante delle immunoglobuline, che definisce l'isotipo delle IgE. Si tratta di una glicoproteina con legami disolfuro intra- e intercatena.
• La specificità di legame all'antigene delle IgE è determinata dai domini variabili generati tramite ricombinazione V(D)J e ipermutazione somatica, che consentono un riconoscimento ad alta affinità. Riferimenti correlati: PMID:17576170, PMID:20176268
• Le IgE secretate mediano le risposte allergiche e antiparassitarie legandosi al recettore ad alta affinità FCER1A sui mastociti, basofili e eosinofili, innescando la degranulazione e il rilascio di istamina, leucotrieni e citochine. Riferimenti correlati: PMID:25629393, PMID:33840121, PMID:8114916, PMID:8551243
• Le IgE interagiscono anche con il recettore a bassa affinità FCER2 sui macrofagi per stimolare l'uccisione dei parassiti e sulle cellule B per migliorare la presentazione dell'antigene. Riferimenti correlati: PMID:7544003, PMID:2167225
• Le IgE legate alla membrana esistono in isoforme lunghe e corte, che formano il complesso del recettore delle cellule B (BCR). La reticolazione del BCR da parte dell'antigene controlla la sopravvivenza e la differenziazione delle cellule B IgE+.
• L'espressione delle IgE si trova prevalentemente nei linfociti B dopo stimolazione con IL-4 e CD40, collegandola alle risposte immunitarie di tipo Th2.
• Lo splicing alternativo del gene IGHE genera le isoforme secretate e due isoforme legate alla membrana, ciascuna con proprietà di segnalazione distinte.
• Risposte IgE disregolate contribuiscono a condizioni allergiche e anafilattiche. Riferimenti correlati: PMID:25629393, PMID:33840121, PMID:7544003

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 104-428 della regione costante delle IgE umane, coprendo i domini CH2-CH4. Questo progetto garantisce il riconoscimento della regione Fc condivisa dalle isoforme secretate e legate alla membrana.
• Per Western blot (WB), si consiglia l'uso di condizioni riducenti; il peso molecolare osservato può essere ~47 kDa come indicato, ma la glicosilazione può spostare la banda o produrre una sfumatura.
• In citofluorimetria (FC), questo anticorpo è adatto per rilevare le IgE legate alla membrana sulle cellule B o le IgE catturate dai recettori Fc sui basofili/mastociti; si raccomandano appropriati controlli isotipici e passaggi di blocco Fc.
• Per applicazioni ELISA, questo anticorpo monoclonale può funzionare come reagente di cattura o rilevamento per la quantificazione totale delle IgE; ottimizzare la concentrazione di rivestimento e abbinarlo a un appropriato anticorpo di rilevamento policlonale o monoclonale anti-IgE.
• Poiché le concentrazioni di IgE nel siero/plasma sono basse, la preparazione del campione e la sensibilità del test devono essere verificate con curve standard utilizzando proteina IgE purificata.

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