Anticorpo policlonale coniglio IgM umana per WB, ELISA - P01871

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'IgM umana

• IGHM codifica la regione costante della catena pesante mu dell'immunoglobulina, formando anticorpi IgM. L'IgM legata alla membrana funge da recettore delle cellule B (BCR) che innesca l'espansione clonale e la differenziazione dopo il legame con l'antigene, mentre l'IgM secreta media l'eliminazione dei patogeni (PubMed:20176268, PubMed:22158414). Riferimenti correlati: PMID:20176268, PMID:22158414

• L'IgM secreta (sIgM) multimerizza in pentameri o esameri, fornendo un riconoscimento e un'avidità degli antigeni ad alta affinità (PubMed:32029689, PubMed:37095205). Riferimenti correlati: PMID:32029689, PMID:37095205

• Le funzioni effetrici della sIgM includono il legame al recettore Fc ad alta affinità FCMR sulle cellule linfoidi, promuovendo risposte neutralizzanti IgG mantenendo l'autotolleranza. Recluta anche C1q per attivare la via del complemento classico e facilita la fagocitosi delle cellule apoptotiche (PubMed:12847249, PubMed:19006321, PubMed:28230186). Riferimenti correlati: PMID:12847249, PMID:19006321, PMID:28230186

• L'IgM svolge un ruolo nell'immunità mucosa: subisce transcitosi attraverso l'epitelio mucoso tramite PIGR e viene secreta nei rivestimenti mucosi. I complessi IgM-antigene subiscono retrotranscitosi mediata da FCMR attraverso le cellule M verso i tessuti linfoidi sottostanti (PubMed:32029689). Riferimenti correlati: PMID:32029689

• L'IgM legata alla membrana è un componente del complesso del recettore delle cellule B, fornendo una segnalazione tonica costitutiva essenziale per la sopravvivenza delle cellule B e mediando la segnalazione del pre-BCR per l'esclusione allelica e il riarrangiamento genico.

• A livello subcellulare, i prodotti IGHM vengono secreti o ancorati come proteine di membrana di tipo I a passaggio singolo sulla superficie cellulare.

• Come glicoproteina con domini di immunoglobulina, l'IgM contiene legami disolfuro intracatena e intercatena che stabilizzano la sua struttura e subisce glicosilazione post-traduzionale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre la regione costante (aa 213-453) di IGHM umano, garantendo il riconoscimento di entrambe le isoforme IgM solubili e legate alla membrana.
• Per il Western blotting, la catena pesante dell'IgM migra a circa 70 kDa in condizioni riducenti a causa della glicosilazione e della regione variabile; i multimeri osservati in condizioni non riducenti possono superare i 900 kDa. Ottimizzare la preparazione del campione e la percentuale del gel di conseguenza.
• In ELISA, questo anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento per l'IgM umana. L'abbinamento con un anticorpo monoclonale di rilevamento anti-IgM umana può migliorare la specificità dell'analisi.
• Essendo un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti deve essere verificata per le applicazioni quantitative; includere un campione di controllo in ogni esecuzione.
• Conservare secondo le raccomandazioni del produttore (tipicamente −20 °C) e ridurre al minimo i cicli di congelamento-scongelamento.

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