TLR3 umano, anticorpo policlonale di coniglio - O15455

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione del TLR3

• Il TLR3 è un membro della famiglia dei recettori toll-like (TLR), componenti chiave dell'immunità innata e adattativa.
• Funziona come recettore sensibile ai nucleotidi, riconoscendo l'RNA a doppio filamento (dsRNA), un pattern molecolare indicativo di un'infezione virale.
• Dopo l'attivazione da parte del dsRNA, il TLR3 trasmette il segnale attraverso la proteina adattatrice TRIF/TICAM1, determinando l'attivazione di NF-kappa-B e la traslocazione nucleare di IRF3, con conseguente secrezione di citochine e risposte infiammatorie.
• La proteina è localizzata nella membrana del reticolo endoplasmatico, nella membrana degli endosomi e negli endosomi precoci, dove entra in contatto con l'RNA virale.
• Il TLR3 è espresso ad alti livelli nella placenta e nel pancreas ed è presente prevalentemente nelle cellule dendritiche tra i leucociti; è inoltre altamente espresso nel cervello, in particolare negli astrociti, nelle cellule gliali e nei neuroni.
• Strutturalmente, il TLR3 contiene un dominio extracellulare con ripetizioni ricche di leucina (LRR), un'elica transmembrana e un dominio citoplasmatico TIR, oltre a un peptide segnale per il targeting di membrana.
• Il gene è sottoposto a splicing alternativo e la proteina è soggetta a modifiche post-traduzionali, tra cui glicosilazione, formazione di ponti disolfuro e fosforilazione.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato per questo anticorpo corrisponde al dominio extracellulare (amminoacidi 24-339) del TLR3 umano, che dovrebbe riconoscere il TLR3 nativo.
• Per l'analisi mediante Western blot (WB), considerare che il TLR3 può migrare a circa 103 kDa (forma glicosilata a lunghezza completa) o 72 kDa (potenzialmente un'isoforma o un prodotto di scissione). Validare con controlli appropriati.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), è necessario ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione, poiché il TLR3 è localizzato principalmente nei compartimenti endosomiali.
• Le applicazioni ELISA possono essere utilizzate per rilevare il TLR3 in lisati cellulari o campioni di proteine purificate; includere IgG di coniglio non immune come controllo negativo.
• Poiché la reattività crociata è stata riportata per l'uomo, la validazione in altre specie non è garantita; se necessario, eseguire un allineamento di sequenza specifico per specie.

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