IFNAR2 Rabbit pAb per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P48551

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di IFNAR2

• IFNAR2 (recettore dell'interferone alfa/beta 2), noto anche come IFNABR, IFNARB o IFN-alpha-REC, codifica la catena beta del recettore dell'interferone di tipo I. Vengono generate multiple isoforme tramite splicing alternativo; in particolare, l'isoforma 3 è una forma secreta rilevata nelle urine (PubMed:7759950, PubMed:8181059). Il recettore è espresso nelle cellule del sangue, nelle linee cellulari linfofibroblastoidi e nei fibrosarcomi. Riferimenti correlati: PMID:7759950 PMID:8181059
• Insieme a IFNAR1, IFNAR2 forma il recettore eterodimerico funzionale per gli interferoni di tipo I (IFN-α, -β, -ε, -ω, -κ) (PubMed:10049744, PubMed:10556041, PubMed:21854986). Il legame del ligando avvicina le subunità, innescando l'attivazione delle chinasi Janus associate. Riferimenti correlati: PMID:10049744 PMID:10556041 PMID:21854986
• L'attivazione del recettore guida la trans-fosforilazione di JAK1 (legato a IFNAR2) e TYK2 (legato a IFNAR1) (PubMed:10556041, PubMed:11682488, PubMed:12105218). Successivamente, specifici residui di tirosina sui domini intracellulari di IFNAR1/2 vengono fosforilati, creando siti di ancoraggio per STAT1 e STAT2 (PubMed:11682488, PubMed:12105218, PubMed:21854986). Riferimenti correlati: PMID:10556041 PMID:11682488 PMID:12105218 PMID:21854986
• Le proteine STAT fosforilate si traslocano nel nucleo per modulare la trascrizione di centinaia di geni stimolati dall'interferone (ISG), orchestrando risposte antivirali, antiproliferative e immunomodulatorie (PubMed:12105218, PubMed:28165510, PubMed:9121453). Riferimenti correlati: PMID:12105218 PMID:28165510 PMID:9121453
• Oltre al suo ruolo nella trasduzione del segnale, IFNAR2 può anche agire come un potente inibitore dell'attività del recettore dell'interferone di tipo I, probabilmente attraverso il legame competitivo del ligando o la regolazione della stabilità del recettore.
• La proteina attraversa la membrana cellulare e contiene domini extracellulari di tipo III della fibronectina; subisce glicosilazione e formazione di legami disolfuro, come evidenziato dalle analisi proteomiche, ed è soggetta a fosforilazione regolatoria.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (aa 27-243), quindi ci si aspetta che l'anticorpo miri alla regione di legame del ligando; adatto per studi di blocco del recettore o per il rilevamento di recettori solubili nei fluidi biologici.
• Per il Western blotting, è prevista una banda a ~58 kDa; tuttavia, a causa della glicosilazione N-legata e del potenziale processing proteolitico, potrebbero essere osservate bande aggiuntive o un peso molecolare apparente più elevato. Validare con controlli positivi (es. cellule trattate con IFN) e negativi.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), è prevista una colorazione di membrana. Per tessuti o cellule che esprimono l'isoforma secreta, potrebbe essere rilevato un segnale citoplasmatico o della matrice extracellulare; dovrebbero essere testati appropriati protocolli di fissazione e permeabilizzazione.
• Per l'ELISA, questo anticorpo policlonale può essere utilizzato come reagente di rilevamento quando abbinato a un adatto anticorpo monoclonale di cattura; la reattività crociata con IFNAR2 di topo e ratto dovrebbe essere verificata nella matrice del saggio.
• Essendo un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti dovrebbe essere monitorata e sono raccomandati esperimenti di titrazione per nuove applicazioni.

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