Anticorpo monoclonale di coniglio JNK3 per WB e ELISA - P53779

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di JNK3

• JNK3, nota anche come proteina chinasi 10 attivata da mitogeni (MAPK10), proteina chinasi 1b attivata da stress (SAPK1b) e chinasi N-terminale c-Jun 3, è una proteina serina/treonina chinasi codificata dal gene MAPK10 (ID gene: 5602). Appartiene alla famiglia delle MAP chinasi ed è attivata specificamente da stimoli di stress.
• La proteina svolge un ruolo centrale nella via di segnalazione SAPK/JNK, dove viene attivata dalle chinasi a doppia specificità a monte MAP2K4/MKK4 e MAP2K7/MKK7 in risposta a citochine proinfiammatorie e stress fisici. Fosforila fattori di trascrizione come JUN, ATF2, JUND e CLOCK-BMAL1, regolando di conseguenza l'attività trascrizionale di AP-1 e i ritmi circadiani. Riferimenti correlati: PMID:22441692, PMID:22327296
• JNK3 è principalmente coinvolta nella proliferazione, differenziazione e migrazione neuronale e nella morte cellulare programmata. Fosforila APP per regolare la segnalazione della proteina precursore dell'amiloide beta durante la differenziazione neuronale e modula la crescita dei neuriti nei neuroni del ganglio spirale.
• La proteina si localizza in diversi compartimenti cellulari tra cui citoplasma, membrana, nucleo e mitocondrio, consentendo diversi ruoli di segnalazione.
• JNK3 mostra un'espressione tessuto-specifica limitata a un sottoinsieme di neuroni nel sistema nervoso, è presente nell'ippocampo, nel cervelletto, nello striato e nel tronco encefalico, con una debole espressione nel midollo spinale. Espressione molto bassa in testicolo e rene.
• Le principali modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione (l'attivazione richiede la fosforilazione da parte di MAP2K4/MAP2K7); la proteina è anche palmitoilata, una modifica che può influenzare l'associazione alla membrana. Contiene inoltre domini di legame all'ATP e ai nucleotidi essenziali per l'attività chinasi.
• Parole chiave aggiuntive associate a JNK3 includono ritmi biologici, riarrangiamento cromosomico, epilessia e disabilità intellettiva, che riflettono il suo ruolo nei processi neurologici e nelle malattie.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 350–450 della MAPK10 umana, una regione che potrebbe essere conservata tra le specie data la reattività crociata riportata con topo e ratto. Questo può supportare studi su più specie.
• Per la WB, il peso molecolare atteso è di circa 44 kDa in condizioni riducenti. Si consiglia di includere controlli positivi appropriati come linee cellulari neuronali (ad esempio SH-SY5Y) o tessuti noti per esprimere JNK3, e considerare l'attivazione di JNK3 con stimoli di stress (ad esempio anisomicina o UV) per migliorare la rilevazione della forma attivata/fosforilata.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione; si raccomanda l'ottimizzazione della concentrazione di rivestimento e delle condizioni di bloccaggio. Il peptide sintetico immunogeno può essere utilizzato come antigene di controllo positivo.
• Poiché l'espressione di JNK3 è specifica dei neuroni, i campioni di tessuto delle regioni cerebrali (ippocampo, cervelletto) sono più propensi a dare segnali positivi rispetto ai tessuti non neuronali.

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