Anticorpo monoclonale coniglio Ubiquitina specifico per legame K48 - P0CG47

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Ubiquitina

• Codificata dal gene UBB, la poliubiquitina-B è una proteina precursore che viene scissa per generare più monomeri di ubiquitina.
• L'ubiquitina esiste libera o legata covalentemente a proteine target tramite un legame isopeptidico, fungendo da versatile modificatore post-traduzionale.
• Le catene di poliubiquitina possono formarsi attraverso diversi legami lisina (es. K6, K11, K29, K33, K48, K63) o legami lineari, ciascuno dei quali determina destini cellulari distinti.
• Le catene di poliubiquitina legate K48 mirano principalmente le proteine alla degradazione da parte del proteasoma 26S, una via critica per il controllo di qualità delle proteine e la regolazione del ciclo cellulare.
• Le catene legate K63 sono coinvolte in processi non proteolitici come l'endocitosi, le risposte al danno al DNA e l'attivazione del fattore di trascrizione NF-kappa-B.
• La localizzazione subcellulare include il citoplasma, il nucleo e la membrana esterna mitocondriale, riflettendo i suoi molteplici ruoli funzionali.
• L'ubiquitina stessa è soggetta a modificazioni post-traduzionali, inclusa fosforilazione e ADP-ribosilazione, che possono modularne l'attività e le interazioni.
• Le catene di poliubiquitina libere (non ancorate) partecipano anche alla segnalazione cellulare, come l'attivazione di proteine chinasi, indipendentemente dalla loro coniugazione ad altre proteine.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico progettato per riconoscere specificamente la topologia della poliubiquitina legata K48; considerare l'uso di controlli specifici per il legame per confermare la specificità dell'anticorpo.
• Per il Western blotting (WB), è consigliata la preparazione del campione in condizioni denaturanti e riducenti per rilevare i coniugati di ubiquitina; validare le prestazioni nel proprio sistema di campionamento specifico.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), i protocolli di fissazione e permeabilizzazione appropriati dovrebbero essere ottimizzati per preservare i segnali dell'ubiquitina; includere controlli negativi per valutare il fondo.
• Per le applicazioni ELISA, gli antigeni di rivestimento dovrebbero essere selezionati con cura per mimare l'epitopo del legame K48; confermare i limiti di rilevamento con standard noti.
• La reattività incrociata è riportata solo per campioni umani; se si lavora con altre specie, verificare l'omologia di sequenza ed eseguire una validazione aggiuntiva.

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