[KD Validated] Anticorpo monoclonale di coniglio anti-ADAR1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P55265

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di ADAR1

• ADAR1 (noto anche come DRADA, p136, IFI-4) è una adenosina deaminasi specifica per l'RNA a doppio filamento che catalizza la conversione dell'adenosina in inosina nell'RNA a doppio filamento (editing dell'RNA da A a I). Questa modifica post-trascrizionale può alterare il riconoscimento dei codoni, lo splicing, la stabilità e la struttura dell'RNA.
  Riferimenti correlati:
  PMID:12618436
  PMID:7565688
  PMID:7972084

• La proteina svolge un ruolo critico nel metabolismo cellulare e virale dell'RNA. I substrati cellulari includono i recettori per i neurotrasmettitori (GRIA2, HTR2C, GABRA3) e la proteina associata al carcinoma della vescica BLCAP, la cui modifica altera le sequenze amminoacidiche e le proprietà funzionali.

• ADAR1 svolge un duplice ruolo nelle infezioni virali: può esercitare effetti antivirali (ad esempio, inibendo la replicazione dell'HCV tramite iper-editing) o effetti provirali (ad esempio, aumentando la replicazione di HDV, MV, VSV e HIV-1). Alcuni effetti sono indipendenti dall'editing, come la soppressione della chinasi antivirale PKR/EIF2AK2.

• ADAR1 è espresso ubiquitariamente, con i livelli più elevati nel cervello e nei polmoni. L'isoforma 5 è sovraespressa negli astrocitomi e la sua espressione aumenta con il grado tumorale.
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  PMID:7972084

• A livello subcellulare, ADAR1 è localizzato nel citoplasma, nel nucleo e nel nucleolo, riflettendo i suoi diversi ruoli nell'elaborazione dell'RNA e nell'immunità innata.

• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, metilazione e ubiquitinazione; la proteina contiene inoltre domini di legame allo zinco e all'RNA. Le mutazioni in ADAR1 sono associate alla sindrome di Aicardi-Goutières (AGS6), una patologia autoimmune.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 610–810 di ADAR1 umano e prende di mira la regione C-terminale. Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è di circa 136 kDa, ma possono essere osservate bande specifiche dell'isoforma; validare utilizzando controlli positivi noti.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P) e l'immunofluorescenza (IF/ICC), si consiglia di ottimizzare il recupero antigenico e la diluizione dell'anticorpo utilizzando tessuti con espressione elevata nota (ad esempio, cervello o polmoni). La co-colorazione con marcatori degli organelli può aiutare a confermare la localizzazione citoplasmatica o nucleare.
• Per le applicazioni ELISA, abbinare a un anticorpo di cattura o di rilevazione appropriato e validare nella matrice del campione pertinente per garantire la specificità per ADAR1.

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