[Convalidato KD] Anti-EGFR Rabbit PolymAb® per WB, IF/ICC, ELISA - P00533

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di EGFR

• EGFR è un recettore tirosin-chinasico che lega ligandi della famiglia EGF e attiva molteplici cascate di segnalazione a valle, inclusi i moduli RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC, STAT e NF-kappa-B, per convertire segnali extracellulari in risposte cellulari come proliferazione, sopravvivenza e migrazione. Riferimenti correlati: PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960, PMID:11116146
• I ligandi noti di EGFR includono EGF, TGFA, AREG, epigen, BTC, epiregulina e HBEGF; il legame del ligando induce dimerizzazione del recettore e autofosforilazione su residui citoplasmatici chiave. Riferimenti correlati: PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• EGFR fosforilato recluta proteine adattatrici come GRB2 e fosforila direttamente substrati come RGS16 (attivandone l'attività GTPasica) e MUC1 (aumentando l'interazione con SRC e beta-catenina), collegandosi alla segnalazione delle proteine G e alle vie di adesione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:11602604, PMID:11483589
• L'isoforma 2 può agire come antagonista dell'azione dell'EGF ed è notevolmente espressa nei tumori ovarici.
• EGFR si localizza prevalentemente alla membrana cellulare, ma anche al reticolo endoplasmatico, all'apparato di Golgi, alla membrana nucleare, agli endosomi e può essere secreto.
• È espresso ubiquitariamente nei tessuti e funge anche da recettore ospite per l'ingresso del virus dell'epatite C (HCV), mediando la formazione del complesso CD81-CLDN1.
• EGFR è coinvolto nella potenziazione a lungo termine e nell'ipersensibilità al dolore (Per somiglianza) e la sua disregolazione è associata a vari tumori.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato è la proteina ricombinante umana di EGFR; gli utenti dovrebbero convalidare la reattività nel loro specifico sistema campione (es. linee cellulari con espressione nota di EGFR come A431).
• Per il Western blot, possono essere osservate multiple bande corrispondenti a EGFR a lunghezza intera (~134 kDa) e frammenti proteolitici (es. 44, 69, 77 kDa); questi sono coerenti con il processamento di EGFR riportato.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, aspettarsi una colorazione della membrana plasmatica e degli endosomi; potrebbe essere necessaria la permeabilizzazione per rilevare pool intracellulari.
• Questo anticorpo è un monoclonale ricombinante di coniglio (PolymAb®) che offre un'elevata consistenza da lotto a lotto, adatto per applicazioni ELISA quantitative.
• Come per qualsiasi anticorpo, le concentrazioni e le condizioni di lavoro ottimali dovrebbero essere determinate sperimentalmente dall'utente finale.

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