[KD Validato] Anticorpo Policlonale Anti-FGFR3 per WB, FC, ELISA - P22607

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di FGFR3

• Il recettore 3 del fattore di crescita dei fibroblasti (FGFR3), anche designato CD333, JTK4 e ACH, è un membro della superfamiglia delle immunoglobuline dei recettori tirosin-chinasici. Multiple isoforme sono generate attraverso splicing alternativo, inclusa un'isoforma secreta (isoforma 3) che mantiene la capacità di legare il ligando.
• FGFR3 è un recettore di superficie cellulare che lega i fattori di crescita dei fibroblasti, innescando cascate di segnalazione intracellulare che regolano la proliferazione, differenziazione e apoptosi cellulare. È essenziale per la normale differenziazione dei condrociti e lo sviluppo scheletrico, e modula anche l'osteogenesi e la mineralizzazione ossea postnatale.
• Il legame del ligando attiva vie chiave: la fosforilazione di PLCG1 produce secondi messaggeri; la fosforilazione di FRS2 recluta GRB2/SOS1 portando all'attivazione di RAS-MAPK (ERK1/2) e coinvolge anche la via di segnalazione di AKT1. Queste cascate mediano diversi esiti cellulari inclusa l'apoptosi nei condrociti e la proliferazione nelle cellule cancerose.
• FGFR3 è localizzato principalmente alla membrana plasmatica ma si trova anche in vescicole citoplasmatiche e nel reticolo endoplasmatico. L'isoforma secreta 3 può interferire con la segnalazione FGF legando i ligandi extracellulari.
• L'espressione tissutale include cervello, rene, testicolo e tessuti fetali come polmone, intestino tenue e rene. L'isoforma 2 è rilevata nelle cellule epiteliali, mentre l'isoforma 1 si trova nelle cellule fibroblastiche.
• La disregolazione di FGFR3, spesso dovuta a mutazioni attivanti, è implicata in displasie scheletriche (es. acondroplasia, displasia tanatofora), craniosinostosi e diversi tumori. FGFR3 costituitivamente attivo promuove la segnalazione di STAT1, STAT5 e PTPN11/SHP2, contribuendo all'oncogenesi.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre la regione extracellulare (amminoacidi 23–375), presente in tutte le isoforme legate alla membrana e secrete. Verificare il rilevamento delle isoforme desiderate nella vostra matrice di campione consultando la letteratura e utilizzando controlli isoforma-specifici.
• Nel Western blot, aspettarsi multiple bande tra 75 e 88 kDa a causa della glicosilazione differenziale e dell'espressione isoforma. Ottimizzare i controlli di caricamento e considerare l'uso di enzimi di deglicosilazione per confermare la specificità.
• Per la citometria a flusso, utilizzare cellule non permeabilizzate per mirare all'FGFR3 di superficie. Includere un controllo isotipo rilevante e validare con linee cellulari che sovraesprimono FGFR3 o con knockdown tramite siRNA.
• In ELISA, l'isoforma secreta 3 potrebbe competere per gli anticorpi di cattura o rilevamento. Pre-depurare i surnatanti di coltura o utilizzare coppie monoclonali/policlonali progettate contro epitopi non sovrapposti.

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