[Convalidato KD] Anticorpo monoclonale di coniglio anti-GALC per WB, IHC-P, ELISA - P54803

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della GALC

• La GALC idrolizza i legami estere del galattosio nei glicolipidi, tra cui galattosilceramide e galattosilsfingosina, e media il catabolismo lisosomiale della galattosilceramide, un lipide principale della mielina, dei reni e degli epiteli. Riferimenti correlati: PMID:8281145, PMID:8399327
• La proteina appartiene alla famiglia 59 delle glicosil-idrolasi ed è altamente conservata nell'uomo, nel topo e nel ratto.
• Lo splicing alternativo dei trascritti di GALC produce molteplici isoforme, che possono avere ruoli regolatori o funzionali distinti.
• A livello subcellulare, la GALC si localizza nel lisosoma, in linea con la sua attività di idrolasi acida.
• La GALC è espressa in vari tessuti, con livelli rilevabili in testicolo, cervello, placenta, urina, reni e fegato.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la glicosilazione N-linked e la formazione di ponti disolfuro, fondamentali per il ripiegamento e la stabilità dell'enzima.
• Le mutazioni con perdita di funzione in GALC causano la malattia di Krabbe (leucodistrofia a cellule globoidi), caratterizzata da grave demielinizzazione e neurodegenerazione.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, una diluizione iniziale di 1:500–1:2.000 è spesso adatta per rilevare la banda della GALC a ~77 kDa nei lisati cellulari o tissutali. Convalidare in campioni pertinenti, come cervello, testicolo o rene.
• Nell'immunoistochimica (paraffina), il recupero antigenico mediante tampone citrato (pH 6,0) può migliorare la colorazione. Si consiglia di utilizzare tessuti di controllo positivo, come cervello o placenta.
• Per le applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione; l'abbinamento e le concentrazioni ottimali devono essere determinati utilizzando GALC ricombinante o campioni biologici calibrati.
• L'anticorpo riconosce la GALC umana, murina e di ratto, rendendolo utile per studi comparativi tra specie.
• In quanto mAb convalidato per il knockdown, può fornire una specificità affidabile per il bersaglio nei saggi di Western blot; gli utenti devono confermare l'efficienza del knockdown nel proprio sistema sperimentale.
• Conservazione e manipolazione: aliquotare e conservare a -20 °C per la stabilità a lungo termine; evitare cicli ripetuti di congelamento e scongelamento.

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