[KD Convalidato] Anticorpo Monoclonale Anti-ISG15 di Coniglio per WB, ELISA - P05161

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ISG15

• ISG15 (gene stimolato dall'interferone 15) è una proteina simile all'ubiquitina di 15-17 kDa, nota anche come G1P2, IP17 e hUCRP, codificata dal gene ISG15 sul cromosoma 1 umano.
• Svolge un ruolo critico nell'immunità antivirale innata coniugandosi ai residui di lisina delle proteine bersaglio (ISGylazione), un processo che coinvolge enzimi E1, E2 ed E3. Riferimenti correlati: PMID:27564865 PMID:39465252 PMID:33727702
• L'ISGylazione promuove l'oligomerizzazione del sensore virale IFIH1/MDA5, attivando l'immunità innata contro coronavirus, flavivirus e picornavirus. Riferimenti correlati: PMID:33727702
• ISG15 libero, non coniugato, viene secreto e agisce come una citochina, inducendo la produzione di IFN-γ e la proliferazione delle cellule NK, e fungendo da fattore chemiotattico per i neutrofili. Riferimenti correlati: PMID:29100055
• A livello subcellulare, ISG15 si trova nel citoplasma e può essere secreto nello spazio extracellulare.
• Mostra un'ampia attività antivirale contro virus sia a DNA che a RNA, inclusi influenza A, HIV-1 e virus Ebola, interrompendo la gemmazione e la replicazione virale.
• ISG15 è espresso nelle cellule linfoidi, nel muscolo striato e liscio, in vari epiteli e nei neuroni. La sua espressione è potenziata in diversi tumori, incluso l'adenocarcinoma pancreatico e il cancro alla vescica.
• Le modifiche post-traduzionali includono S-nitrosilazione e formazione di legami disolfuro, e partecipa alla via di coniugazione simile all'ubiquitina.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde all'ISG15 umano a lunghezza intera (amminoacidi 1-165), suggerendo il riconoscimento dell'anticorpo per la proteina nativa. Confermare la specificità nella vostra matrice di campione.
• Per il western blot, la banda attesa è a ~18 kDa in condizioni riducenti. Utilizzare controlli positivi appropriati (ad es., cellule trattate con interferone) per verificare il rilevamento.
• È riportata reattività crociata con ISG15 di topo e ratto; tuttavia, convalidare la reattività nel vostro specifico sistema sperimentale, poiché l'omologia tra specie potrebbe influenzare l'intensità del segnale.
• I protocolli ELISA potrebbero richiedere l'ottimizzazione dell'antigene di rivestimento e della concentrazione dell'anticorpo. Considerare l'uso della proteina ISG15 ricombinante come standard.

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