[Validato KD] Anticorpo policlonale coniglio anti-LC3B per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q9GZQ8

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della LC3B

• LC3B (MAP1LC3B) è un modificatore simile all'ubiquitina essenziale per la formazione di vacuoli autofagosomici durante la macroautofagia.
  Riferimenti correlati:
  PMID:20418806, PMID:23209295, PMID:28017329

• Gioca un ruolo critico nella mitofagia legando le ceramidi C-18 e ancorando gli autofagolisosomi alla membrana esterna dei mitocondri per eliminare i mitocondri danneggiati.
  Riferimenti correlati:
  PMID:22922758

• LC3B promuove la ciliogenesi primaria attraverso la rimozione dipendente dall'autofagia di OFD1 dai satelliti centriolari.
  Riferimenti correlati:
  PMID:24089205

• In condizioni di stress nutrizionale, LC3B interagisce con il recettore della reticulofagia TEX264 per rimodellare i sottodomini del reticolo endoplasmatico in autofagosomi per il ricambio del RE.
  Riferimenti correlati:
  PMID:31006537, PMID:31006538

• LC3B recluta direttamente JMY alla membrana del forifago, stimolando la nucleazione dell'actina e la biogenesi degli autofagosomi.
  Riferimenti correlati:
  PMID:30420355

• Le LC3 sono principalmente coinvolte nell'allungamento del forifago, mentre la sottofamiglia GABARAP/GATE-16 funziona in una fase successiva della maturazione dell'autofagosoma.
  Riferimenti correlati:
  PMID:20418806, PMID:23209295, PMID:28017329

• A livello subcellulare, LC3B si localizza sulle membrane degli autofagosomi, sulle membrane mitocondriali, sulle vescicole citoplasmatiche e sul citoscheletro.

• Espressione tissutale: più abbondante nel cuore, cervello, muscolo scheletrico e testicolo; bassa nel fegato.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-100) di LC3B umano, che è presente sia nella forma non coniugata (LC3B-I) che in quella lipidata (LC3B-II). Considerare questo design durante l'interpretazione dei risultati in diversi stati autofagici.
• Per il Western blot, una diluizione iniziale di 1:500–1:2000 è spesso adatta; tuttavia, si raccomanda l'ottimizzazione nel proprio sistema sperimentale. Ci si aspetta di osservare due bande corrispondenti a LC3B-I e LC3B-II, con LC3B-II che migra leggermente più velocemente.
• Nell'immunofluorescenza (IF-P) e nell'immunoistochimica (IHC-P), includere controlli appropriati (es. induzione dell'autofagia) e validare la specificità del segnale con campioni knockdown o knockout se disponibili.

Dato che l'anticorpo mostra reattività crociata con LC3B di topo e ratto, confermare l'omologia di sequenza se si utilizzano queste specie e considerare l'esecuzione di uno studio pilota per valutare le prestazioni in campioni non umani.

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