[KD Convalidato] Anticorpo Policlonale Anti-MAD1/MAD1L1 per WB, ELISA - Q9Y6D9

Specifiche e Parametri Nucleari del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di MAD1/MAD1L1

• MAD1L1 (nota anche come MAD1, TXBP181) codifica per la proteina MAD1 del checkpoint di assemblaggio del fuso mitotico, un guardiano critico della fedeltà mitotica.
• Forma un complesso eterotetramerico con MAD2L1 chiusa (C-MAD2) ai cinetocori non attaccati, promuovendo la conversione di MAD2L1 aperta (O-MAD2) in C-MAD2 per propagare il segnale "aspetta anafase". Riferimenti correlati: PMID:10049595 PMID:20133940 PMID:29162720
• Nel carcinoma epatocellulare, MAD1 può sequestrare MAD2L1 nel citoplasma, compromettendo il checkpoint di assemblaggio del fuso e contribuendo all'instabilità cromosomica.
• La proteina si localizza dinamicamente ai cinetocori, ai centrosomi, ai poli del fuso e all'involucro nucleare durante la mitosi, e attraversa anche il citoplasma.
• MAD1 è soggetta a modificazioni post-traduzionali, inclusa fosforilazione e acetilazione, che ne regolano le funzioni dipendenti dal ciclo cellulare.
• L'espressione tissutale è notevole nei carcinomi epatocellulari e nelle linee cellulari di epatoma, in linea con la sua rilevanza oncogenica.
• Lo splicing alternativo di MAD1L1 genera molteplici isoforme e le mutazioni sono associate a difetti del checkpoint correlati al cancro.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 351–718 di MAD1 umano, comprendendo una grande regione C-terminale conservata tra le isoforme; questo anticorpo policlonale può quindi riconoscere varianti multiple.
• Per il Western blot, il peso molecolare atteso è di circa 83 kDa; utilizzare un gel SDS-PAGE al 10% e assicurare un trasferimento completo per proteine ad alto peso molecolare.
• La reattività ELISA deve essere convalidata nelle specifiche condizioni del saggio; considerare titrazioni a scacchiera per determinare le concentrazioni ottimali dell'antigene di rivestimento e dell'anticorpo.
• Come per qualsiasi reagente policlonale, la consistenza tra lotti dovrebbe essere confermata utilizzando un lisato cellulare standardizzato o una proteina ricombinante.

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