[Validato KD] Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-SREBF1 per WB, IHC-P, ELISA - Q9WTN3

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di SREBF1

• SREBF1 viene sintetizzato come precursore incorporato nella membrana del reticolo endoplasmatico. In condizioni di basso contenuto di steroli, viene scisso per rilasciare un fattore di trascrizione che entra nel nucleo e attiva i geni per la biosintesi del colesterolo e l'omeostasi lipidica (PubMed:11782483, PubMed:12855691, PubMed:19244231, PubMed:16100574). Riferimenti correlati: PMID:11782483 PMID:12855691 PMID:19244231 PMID:16100574
• SREBF1 attivo lega i motivi SRE-1 e E-box, regolando i promotori dei geni della biosintesi del colesterolo e la via del recettore LDL (PubMed:17290224, PubMed:19244231, PubMed:21459323). Il legame con i motivi E-box è inferito per similarità. Riferimenti correlati: PMID:17290224 PMID:19244231 PMID:21459323
• L'isoforma SREBP-1A è espressa in tessuti selezionati, ha un'attività trascrizionale elevata e stimola sia i geni lipogenici che quelli colesterogenici; contribuisce anche all'immunità innata nei macrofagi (PubMed:8833906, PubMed:12855691, PubMed:21531336, PubMed:9062341). Riferimenti correlati: PMID:8833906 PMID:12855691 PMID:21531336 PMID:9062341
• L'isoforma SREBP-1C è la forma predominante nella maggior parte dei tessuti, ha un'attività più debole e controlla principalmente i geni lipogenici, guidando fortemente la sintesi lipidica nelle cellule in proliferazione (PubMed:8833906, PubMed:9062341, PubMed:12855691, PubMed:21531336). Riferimenti correlati: PMID:8833906 PMID:9062341 PMID:12855691 PMID:21531336
• Localizzazione subcellulare: SREBF1 cicla tra la membrana del reticolo endoplasmatico, la membrana dell'apparato di Golgi, le vescicole rivestite di COPII e il nucleo in modo dipendente dai steroli.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione e ubiquitinazione, che regolano la stabilità proteica e l'attività trascrizionale.
• Specificità tissutale: SREBF1 è ampiamente espresso. SREBP-1C predomina nel fegato, ghiandola surrenale, cervello e tessuto adiposo, mentre SREBP-1A è espresso selettivamente in tessuti come l'epitelio intestinale e i macrofagi.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico della regione N-terminale (amminoacidi 1-100) di SREBP1 di topo. Questa regione è conservata tra topo e uomo, e supporta la reattività crociata.
• Per Western blot, la proteina SREBF1 full-length migra a ~120 kDa; consigliamo di utilizzare percentuali di gel e condizioni di trasferimento appropriate per proteine ad alto peso molecolare. Potrebbe essere necessaria la deplezione di steroli per rilevare la forma nucleare processata.
• In immunoistochimica (IHC-P), validare la specificità dell'anticorpo utilizzando tessuti di controllo positivo e negativo; sia tessuti umani che di topo possono essere testati grazie alla reattività crociata.
• Per ELISA, utilizzare il peptide di immunizzazione come controllo positivo e ottimizzare le condizioni di rivestimento.

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