[Validato KD] Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CDK2 per WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - P24941

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CDK2

• CDK2 (chinasi 2 ciclina-dipendente, p33) è una serina/treonina-protein chinasi essenziale per la progressione del ciclo cellulare, in particolare per la transizione G1-S e l'ingresso nella fase S, dove fosforila RB1 per liberare E2F1 e promuovere la trascrizione.
  Riferimenti correlati: PMID:10499802, PMID:10995386

• Innesca la duplicazione dei centrosomi fosforilando NPM1 e promuove la progressione da S a G2 attraverso l'attivazione, mediata da ciclina A/CDK2, della trascrizione dei geni degli istoni tramite la fosforilazione di NPAT.
  Riferimenti correlati: PMID:11051553, PMID:10995387

• CDK2 fosforila BRCA2 per regolare la riparazione del DNA dipendente dalla ricombinazione omologa, con una bassa fosforilazione durante la ricombinazione attiva nella fase S e una fosforilazione aumentata in prossimità della mitosi; fosforila inoltre NBN per la riparazione dei telomeri.
  Riferimenti correlati: PMID:15800615, PMID:20195506, PMID:28216226

• La chinasi si localizza in molteplici compartimenti subcellulari, tra cui il nucleo (corpi di Cajal), il citoplasma, i centrosomi e gli endosomi, in accordo con le sue funzioni pleiotropiche.

• L'attività di CDK2 è regolata dal legame con la ciclina E/A, dalla fosforilazione attivante operata dal complesso CAK CDK7/ciclina H/MAT1 e dalla S-nitrosilazione; inoltre, funge da substrato per la deubiquitinasi USP37 durante la transizione G1-S.
  Riferimenti correlati: PMID:41100585, PMID:20079829, PMID:21596315

• Nelle cellule staminali embrionali, CDK2 coordina l'equilibrio tra proliferazione, apoptosi e riparazione del DNA, e la sua inattivazione media l'inibizione della crescita indotta dalla vitamina D.
  Riferimenti correlati: PMID:18372919, PMID:19238148, PMID:20147522

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente alla regione C-terminale (amminoacidi 200-298) della CDK2 umana. Questa regione è conservata nel topo e nel ratto, supportando la reattività crociata; tuttavia, è necessario effettuare una validazione nel sistema di campioni di interesse.
• Per il Western blot, la CDK2 endogena viene generalmente rilevata intorno a 30–34 kDa, mentre le bande a migrazione più lenta rappresentano forme fosforilate. Si consiglia di utilizzare inibitori delle fosfatasi nei tamponi di lisi.
• Adatto per immunofluorescenza (IF/ICC e IF-P) e immunoistochimica (IHC-P). Si raccomanda l'ottimizzazione delle condizioni di fissazione (ad es. PFA al 4%) e permeabilizzazione (ad es. Triton X-100 allo 0,1%).
• Per l'ELISA, si consiglia l'abbinamento con un anticorpo di cattura adeguato e la validazione con la proteina CDK2 ricombinante.

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