Anticorpo policlonale convalidato KD DNMT1 per coniglio per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P26358

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di DNMT1

• DNA (citosina-5)-metiltransferasi 1 (DNMT1), nota anche come CXXC9, MCMT, AIM, HSN1E, ADCADN e m.HsaI, è essenziale per il mantenimento dei pattern di metilazione del DNA durante la divisione cellulare.
• Metila i residui di CpG, con una preferenza per il DNA emimetilato, garantendo l'ereditarietà epigenetica durante la replicazione del DNA.
  Riferimenti correlati:
  PMID:17200670
  PMID:18754681
  PMID:21745816
  PMID:26070743
• Si associa ai siti di replicazione del DNA nella fase S per copiare il pattern di metilazione sul filo appena sintetizzato, e lega anche la cromatina durante la fase G2/M per il mantenimento indipendente dalla replicazione.
  Riferimenti correlati:
  PMID:17200670
  PMID:21745816
• Media la repressione trascrizionale tramite interazione diretta con l'istone deacetilasi 2 (HDAC2).
  Riferimenti correlati:
  PMID:10888872
• Collabora con DNMT3B e CTCFL/BORIS per attivare l'espressione del gene BAG1 attraverso la modulazione della dimetilazione dell'istone H3 (H3K4 e H3K9).
  Riferimenti correlati:
  PMID:18413740
• Forma un complesso corepressore richiesto per l'ipermetilazione del promotore mediata da KRAS e il silenziamento dei geni oncosoppressori nelle cellule di cancro colorettale; mantiene anche la repressione trascrizionale nelle cellule staminali embrionali indifferenziate.
  Riferimenti correlati:
  PMID:24623306
• Si localizza nel nucleo e nei cromosomi. È espresso in modo ubiquo, con i livelli più alti nei tessuti fetali, cuore, rene, placenta e cellule mononucleate del sangue periferico.
• Contiene un dominio a dito di zinco di tipo CXXC; è soggetto a modifiche post-traduzionali tra cui acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1-124 di DNMT1, una regione N-terminale che può essere esposta sia nella forma full-length che in alcune isoforme troncate. Per applicazioni come il western blotting (WB), utilizzare condizioni riducenti e marcatori di peso molecolare appropriati intorno a 183 kDa.
• A causa delle grandi dimensioni di DNMT1 (~183 kDa), si consiglia di utilizzare gel di poliacrilammide a bassa percentuale (ad esempio 6-8%) e tempi di trasferimento prolungati per garantire un blotting efficiente.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P) e l'immunofluorescenza (IF/ICC), ottimizzare le condizioni di recupero dell'antigene e permeabilizzazione per il tuo tipo specifico di tessuto o cellula.
• L'anticorpo presenta reattività crociata con campioni di uomo, topo e ratto. Convalidare la specificità nel tuo sistema sperimentale, utilizzando controlli positivi e negativi appropriati.
• Per ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di rilevamento o di cattura; l'accoppiamento con altri anticorpi anti-DNMT1 può richiedere test per ottenere prestazioni ottimali.

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