[Convalidato KD] Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-TIMM13 per WB, IF/ICC, ELISA - Q9Y5L4

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di TIMM13

• TIMM13 codifica per la subunità Tim13 del traslocasi della membrana interna mitocondriale, un chaperone dello spazio intermembrana mitocondriale di ~10.5 kDa (UniProt: Q9Y5L4).
• Agisce come una proteina simile a un chaperone che previene l'aggregazione di precursori idrofobici e li guida attraverso lo spazio intermembrana mitocondriale durante l'importazione.
• Insieme a TIMM8, forma il complesso TIMM8-TIMM13, che media specificamente l'importazione di proteine multipasso della membrana interna come TIMM23, SLC25A12/ARALAR1 e SLC25A13/ARALAR2; il correlato complesso TIMM9-TIMM10 gestisce una gamma più ampia di substrati.
• Localizzato nella membrana interna mitocondriale, coerente con il suo ruolo nelle fasi successive della traslocazione proteica.
• Espresso ubiquitariamente, con i livelli più alti nel cuore, rene, fegato e muscolo scheletrico – tessuti con alto contenuto mitocondriale e richiesta energetica.
• La proteina subisce modificazioni post-traduzionali tra cui acetilazione e fosforilazione, e contiene residui di cisteina conservati che formano ponti disolfuro; lega anche ioni zinco, caratteristica dei piccoli chaperoni Tim.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre i primi 95 amminoacidi N-terminali di TIMM13 umano, suggerendo che l'anticorpo riconosca la proteina nativa a lunghezza intera; considerare l'uso di proteina TIMM13 ricombinante o di un lisato di controllo positivo (es. HeLa o HEK293) per la convalida iniziale.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è di circa 11 kDa; utilizzare un gel di SDS-PAGE al 15% e ottimizzare le condizioni di trasferimento per proteine piccole per garantire bande nitide.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, è prevista una colorazione mitocondriale; confermare la specificità mediante co-colorazione con un marcatore mitocondriale come Tom20 o utilizzando MitoTracker.
• L'anticorpo è convalidato per ELISA; considerare l'abbinamento con un anticorpo di cattura per applicazioni ELISA sandwich mirate a TIMM13 e convalidare la specificità con antigene ricombinante.
• Poiché la reattività incrociata è confermata solo per la specie umana, testare in campioni di origine umana e prestare attenzione alle potenziali variazioni epitopo-specifiche della specie durante la progettazione degli esperimenti.

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