[KD Validato] Anticorpo policlonale coniglio TRIM21/SS-A per WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P19474

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di TRIM21

• TRIM21/SS-A è una ligasi E3 ubiquitina-proteina con dominio dito di zinco di tipo RING, B-box e domini a elica superavvolta. Collabora con gli enzimi E2 (UBE2D1, UBE2D2, UBE2E1, UBE2E2) per ubiquitinare substrati tra cui USP4, IKBKB e CDKN1B, e forma complessi simili a SCF che regolano la progressione del ciclo cellulare. Riferimenti correlati: PMID:16297862, PMID:16316627, PMID:16472766, PMID:1688051111, PMID:19675099

• Regola negativamente l'immunità innata attraverso la degradazione mediata dall'ubiquitina di IRF3 e la monoubiquitinazione di IKBKB per inibire la segnalazione NF-kB. Promuove anche l'ubiquitinazione di IRF8 per potenziare la trascrizione dei geni delle citochine. Riferimenti correlati: PMID:18641315, PMID:19675099

• Media la degradazione ubiquitina-proteasomica della catena pesante IgG1 tramite la via ERAD dipendente da VCP. Riferimenti correlati: PMID:18022694

• Forma una particella ribonucleoproteica con molecole di RNA hY; esistono almeno due isoforme con differenze specifiche per i tessuti. Riferimenti correlati: PMID:1985094, PMID:8666824

• Potenzia l'attività di decapping dell'mRNA di DCP2, collegandosi alla regolazione post-trascrizionale. Riferimenti correlati: PMID:18361920

• Gioca un ruolo chiave nell'autofagia organizzando il complesso autofagico (ULK1, BECN1, ATG8) e regolando la stabilità di FIP200 attraverso l'ubiquitinazione. Riferimenti correlati: PMID:26347139, PMID:36359729

• Risposte antivirali: catalizza l'ubiquitinazione legata a Lys-27 di MAVS per potenziare l'immunità innata; media l'ubiquitinazione legata a Lys-6 di ISG12a per promuovere la piroptosi; e facilita la formazione del complesso NMI-IFI35 tramite ubiquitinazione legata a Lys-63. Regola anche lo smontaggio dei granuli di stress attraverso l'ubiquitinazione di G3BP1 in seguito a shock termico. Riferimenti correlati: PMID:29743353, PMID:36426955, PMID:26342464, PMID:36692217

• A livello subcellulare, TRIM21 si localizza nel citoplasma, nucleo, autofagosomi, corpi P e granuli di stress. Le isoforme sono espresse nel cuore fetale e adulto e nel polmone fetale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blotting, è prevista una banda di circa 54kDa; validare l'espressione nelle linee cellulari umane, murine o di ratto pertinenti. Considerare il caricamento di controlli positivi appropriati (es. HEK293, HeLa).
• Immunoprecipitazione: Utilizzare condizioni di lisi nativa per preservare le potenziali interazioni proteiche; la natura policlonale può potenziare la cattura dei complessi TRIM21.
• Immunofluorescenza/ICC e IHC-P: Poiché TRIM21 si localizza in più compartimenti (citoplasma, nucleo, granuli di stress), ottimizzare i protocolli di fissazione/permeabilizzazione. Il recupero dell'antigene potrebbe essere richiesto per IHC-P.
• La reattività incrociata con TRIM21 di mouse e ratto consente l'uso traslazionale nei modelli roditori; verificare mediante allineamento delle sequenze e testare nel campione della specie appropriata.
• ELISA: Questo anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o rilevamento; considerare l'abbinamento con un anticorpo monoclonale di rilevamento per lo sviluppo di ELISA a sandwich.
• Poiché l'immunogeno è un frammento ricombinante (aa 86-334), si prevede che l'anticorpo riconosca entrambe le principali isoforme. Confermare la specificità dell'isoforma nel proprio sistema sperimentale.

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