Anticorpo monoclonale di coniglio contro KHDRBS1/Sam68 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q07666

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di KHDRBS1/Sam68

• KHDRBS1, noto anche come p62, p68 o Sam68 (proteina di 68 kDa associata a Src nella mitosi), è una proteina legante l'RNA contenente un dominio KH che funziona come adattatore nella trasduzione del segnale.
• Dopo fosforilazione della tirosina da parte di recettori come quelli delle cellule T, della leptina e dell'insulina, KHDRBS1 lega le proteine contenenti domini SH2 e SH3 per propagare la segnalazione a valle.
• KHDRBS1 modula lo splicing alternativo di numerosi bersagli: CD44 (PubMed:26080397), BCL2L1 e SMN1 (PubMed:17371836, PubMed:20186123) e NRXN1/NRXN3 (per similarità). Riferimenti correlati: PMID:26080397, PMID:17371836, PMID:20186123
• È implicato nella regolazione della stabilità dell'mRNA, della traduzione e dell'esportazione nucleare; tuttavia, il suo ruolo nell'esportazione di RNA contenenti CTE è oggetto di dibattito (PubMed:22253824). Riferimenti correlati: PMID:22253824
• Ulteriori funzioni includono un ruolo nella progressione del ciclo cellulare G2-M e nella repressione dell'attivazione trascrizionale dipendente da CBP.
• Subcellularmente, KHDRBS1 si localizza nel nucleo, nel citoplasma e sulla membrana.
• È espresso ubiquitariamente in tutti i tessuti; l'isoforma 1 è meno abbondante nel cervello, muscolo scheletrico e fegato, mentre l'isoforma 3 è più espressa nel muscolo scheletrico e fegato. L'isoforma 3, espressa nelle cellule in arresto della crescita, inibisce la fase S.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, acetilazione, metilazione, formazione di legami isopeptidici (ubiquitinazione) e altre, come indicato dalle parole chiave di UniProt.

Linee guida sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico mappato tra gli amminoacidi 1–100 di KHDRBS1 umana, che bersaglia la regione N-terminale. Questa regione è presente in tutte le isoforme, quindi l'anticorpo può riconoscere più varianti; si consiglia di verificare la reattività specifica per l'isoforma.
• Per il Western blotting è prevista una banda corrispondente a ~48 kDa; tuttavia, a causa delle modifiche post-traduzionali, si possono osservare più bande o spostamenti. Ottimizzare le condizioni di caricamento e rilevamento.
• L'anticorpo è validato per l'uso su campioni di uomo, topo e ratto. Per applicazioni non elencate (ad esempio IP, ChIP), validare nel sistema di campioni corrispondente.
• Per IHC-P e IF/ICC, è necessario ottimizzare metodi appropriati di fissazione e recupero dell'antigene. Si raccomanda l'uso di controlli positivi e negativi.
• L'ELISA può essere utilizzato per il rilevamento quantitativo; l'abbinamento con un anticorpo di cattura può migliorare la sensibilità nei formati sandwich.

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