[Validato KO] Anticorpo monoclonale di coniglio anti-ACLY per WB, IP, IF/ICC, ELISA - P53396

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di ACLY

• La ATP-citrato liasi (ACLY) è un enzima metabolico chiave che catalizza la scissione ATP-dipendente del citrato in ossalacetato e acetil-CoA, collegando il metabolismo dei carboidrati a quello dei lipidi.
• L'acetil-CoA prodotto è un substrato fondamentale per la sintesi lipidica de novo, l'acetilazione delle proteine e altri processi biosintetici, rendendo ACLY un regolatore centrale dell'omeostasi energetica cellulare.
• ACLY appartiene alla famiglia delle citrato sintasi ed è evolutivamente conservata; nell'uomo la proteina è codificata dal gene ACLY (GeneID: 47) e comprende molteplici isoforme generate dallo splicing alternativo.
• La proteina è localizzata prevalentemente nel citoplasma/citosol, dove utilizza il citrato di origine mitocondriale per sostenere la lipogenesi e l'acetilazione degli istoni nel nucleo dopo la traslocazione.
• Le modifiche post-traduzionali, tra cui fosforilazione e acetilazione, modulano l'attività enzimatica e la stabilità di ACLY; la fosforilazione di specifici residui di serina risponde ai segnali insulinici e nutrizionali.
• Le parole chiave associate ad ACLY includono legame all'ATP, legame al magnesio, fosfoproteina e attività transferasica, riflettendo il suo meccanismo catalitico e i suoi ruoli regolatori.
• La disregolazione dell'espressione o dell'attività di ACLY è stata associata a disturbi metabolici e al cancro, rendendola un bersaglio di interesse per interventi terapeutici.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1000–1101 di ACLY umano (P53396). Per risultati ottimali nel WB, considerare condizioni di elettroforesi su gel denaturante e di trasferimento adatte a proteine ad alto peso molecolare (~121 kDa).
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), includere fasi appropriate di fissazione e permeabilizzazione per preservare la localizzazione citoplasmatica. Ove possibile, validare la specificità dell'anticorpo utilizzando controlli knockout o knockdown.
• Negli esperimenti di immunoprecipitazione (IP), determinare empiricamente il rapporto ottimale tra anticorpo e lisato e confermare le proteine co-immunoprecipitate con controlli appropriati. La validazione KO dell'anticorpo ne supporta la specificità nelle applicazioni WB.

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