[Convalidato KO] Anticorpo policlonale coniglio anti-Ajuba per WB, ELISA - Q96IF1

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Ajuba

• Ajuba è una proteina scaffold contenente domini LIM codificata dal gene AJUBA, coinvolta nell'assemblaggio di complessi proteici diversificati che governano il destino cellulare, l'organizzazione del citoscheletro e la trascrizione genica.
• Contribuisce all'integrità delle giunzioni cellula-cellula epiteliali collegando i recettori adesivi basati sulla cadherina al citoscheletro di actina, rafforzando così l'adesione cellulare.
• Ajuba agisce come un corepressore trascrizionale per molteplici fattori, inclusi SNAI1 e SNAI2/SLUG, per sopprimere l'espressione di E-cadherina, e funge anche da corepressore dipendente da HDAC per un sottoinsieme di geni bersaglio di GFI1.
• La proteina localizza in diversi compartimenti subcellulari, inclusi il citoplasma, il citoscheletro, la membrana cellulare, le giunzioni cellulari, il nucleo, il centrosoma e i corpi P, riflettendo i suoi ruoli multifunzionali.
• Nella regolazione mitotica, Ajuba modula l'attività della chinasi AURKA, contribuendo all'impegno mitotico e alla progressione.
• Funziona nella segnalazione dell'ipossia fungendo da ponte tra le prolil idrossilasi e VHL, promuovendo così un'efficiente degradazione di HIF1A in condizioni normossiche.
• Ajuba regola negativamente la via di segnalazione Hippo antagonizzando la fosforilazione di YAP1, influenzando così il controllo delle dimensioni degli organi e la tumorigenesi.
• La proteina contiene domini LIM che mediano le interazioni proteina-proteina e il legame dello zinco, ed è soggetta a splicing alternativo e fosforilazione, che possono modulare le sue diverse attività cellulari.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione che copre gli amminoacidi 201–290, situata nella porzione centrale di Ajuba; questa progettazione può fornire una buona specificità attraverso gli isoformi.
• Per il Western blotting, è prevista una banda vicino a 57 kDa; considerare l'uso di condizioni riducenti e convalidare il rilevamento con controlli appropriati (es. lisati di cellule knockout o campioni trattati con siRNA).
• Nelle applicazioni ELISA, il rivestimento con l'immunogeno ricombinante o la proteina a lunghezza intera può fungere da controllo positivo; ottimizzare empiricamente le diluizioni dell'anticorpo per il sistema di saggio.
• Quando si lavora attraverso specie diverse, notare la cross-reattività documentata con umano e ratto; verificare le prestazioni in altri campioni pertinenti se necessario.
• Data la partecipazione di Ajuba a molteplici vie di segnalazione, considerare stimoli specifici per la via (es. IL-1β, ipossia) per valutare cambiamenti nell'espressione proteica o nella localizzazione dipendenti dal contesto.

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