[Convalidato KO] Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-AMPKα1 per WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q13131

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'AMPKα1

• Codificato dal gene PRKAA1, l'AMPKα1 (sottounità catalitica alfa-1 della proteina chinasi attivata dal 5'-AMP) è noto anche come chinasi ACACA, chinasi HMGCR e chinasi della proteina tau PRKAA1.
• Funziona come sottounità catalitica dell'AMPK, un importante sensore di energia che attiva le vie di produzione di energia e inibisce i processi di consumo energetico in risposta a bassi livelli intracellulari di ATP.
  Riferimenti correlati:
  PMID:17307971
  PMID:17712357
  PMID:24563466
• Fosforila direttamente e inattiva enzimi metabolici coinvolti nella sintesi dei lipidi (es. ACACA, ACACB, HMGCR, LIPE) e regola la sintesi del colesterolo.
  Riferimenti correlati:
  PMID:34077757
• Modula la trascrizione e la struttura della cromatina fosforilando fattori di trascrizione e istoni, inclusa l'istona H2B in Ser-36, per riprogrammare l'espressione genica.
  Riferimenti correlati:
  PMID:11518699
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  PMID:15866171
• Regola negativamente la segnalazione mTORC1 e stimola l'autofagia in condizioni di limitazione nutrizionale tramite la fosforilazione di TSC2, RPTOR, WDR24 e ULK1.
  Riferimenti correlati:
  PMID:14651849
  PMID:18439900
  PMID:20160076
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  PMID:37079666
• Si localizza nel citoplasma, nel nucleo e nei endosomi tardivi, coerente con i suoi ruoli multifunzionali nella segnalazione metabolica e nel traffico.
• Parole chiave: L'AMPKα1 è una chinasi serina/treonina legante l'ATP che partecipa all'autofagia, al metabolismo lipidico, alla regolazione della cromatina, al controllo del ciclo cellulare e alle interazioni ospite-virus.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli aminoacidi 381-480, una regione vicino al terminale C dell'AMPKα1 umano. Ciò potrebbe influenzare il rilevamento in mutanti di troncamento o nel riconoscimento specifico per isoforma; convalidare nel sistema di campione pertinente.
• Per il Western blotting (WB), il peso molecolare previsto è di ~64 kDa. Utilizzare inibitori di proteasi/fosfatasi freschi e considerare controlli di carico come la β-actina.
• I dati di convalida Knockout (KO) supportano la specificità nei campioni umani; i lisati cellulari KO sono raccomandati come controlli negativi.
• Per l'immunoprecipitazione (IP), la pre-pulizia dei lisati e l'utilizzo di un passo di centrifugazione a bassa velocità possono ridurre il legame non specifico.
• Nell'immunocitochimica/immunofluorescenza (IF/ICC), la fissazione con PFA al 4% e la permeabilizzazione con Triton X-100 allo 0,1% sono condizioni di partenza tipiche.
• Le applicazioni ELISA, IHC-P e IF/ICC potrebbero richiedere il recupero dell'antigene o l'ottimizzazione del rivestimento proteico; titolare l'anticorpo primario per un rapporto segnale-rumore ottimale.
• È indicata la reattività crociata con l'AMPKα1 di topo e ratto; tuttavia, si consiglia l'allineamento della sequenza della regione immunogenica per confermare la coerenza tra le specie.

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