[Convalidato KO] Anticorpo policlonale Anti-ATG5 per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q9H1Y0

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'ATG5

• ATG5, noto anche come proteina 5 dell'autofagia, APG5-simile o proteina specifica dell'apoptosi, è un componente fondamentale della macchina dell'autofagia. È codificato dal gene ATG5 ed è ampiamente espresso nei tessuti umani.
• ATG5 è essenziale per la formazione delle vescicole autofagiche. Si coniuga con ATG12 tramite un sistema simile all'ubiquitina che coinvolge ATG7 (simile a E1) e ATG10 (simile a E2), formando il coniugato ATG12-ATG5. Questo coniugato agisce come un enzima simile a E3, facilitando la lipidazione delle proteine della famiglia ATG8 e la loro associazione con le membrane vescicolari.
• La proteina svolge ruoli critici nel controllo della qualità mitocondriale, nella longevità cellulare, nello sviluppo dei linfociti, nella presentazione degli antigeni per MHC II, nel mantenimento della morfologia degli assoni, nella differenziazione degli adipociti e nella ciliogenesi primaria rimuovendo OFD1 dai satelliti centriolari.
• ATG5 è localizzato nel citoplasma e sulla membrana della struttura pre-autofagosomale, coerente con la sua funzione nell'autofagia.
• ATG5 è coinvolto nell'apoptosi, dove la sua espressione è un evento relativamente tardivo a valle dell'attività delle caspasi. Media la morte cellulare autofagica indotta da IFN-gamma interagendo con FADD.
• (Infezione microbica) ATG5 può agire come un fattore provirale. Regola negativamente la risposta immunitaria antivirale innata compromettendo la produzione di IFN di tipo I durante l'infezione da virus della stomatite vescicolare (VSV) (PubMed:17709747). Inoltre, è richiesto per la traduzione dell'RNA entrante del virus dell'epatite C (HCV) e l'avvio della replicazione dell'HCV (PubMed:19666601). Riferimenti correlati: PMID:17709747, PMID:19666601
• La proteina subisce acetilazione ed è parte di un sistema di coniugazione simile all'ubiquitina (legame isopeptidico). È associata a parole chiave tra cui struttura 3D, splicing alternativo, variante della malattia, interazione ospite-virus e neurodegenerazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1-275 dell'ATG5 umano (NP_004840.1), che rappresenta la proteina a lunghezza intera. Questo design probabilmente cattura la conformazione nativa e può migliorare il riconoscimento dell'ATG5 endogeno.
• L'anticorpo è convalidato per WB, IF/ICC, IHC-P ed ELISA. Per WB, è prevista una banda a ~32 kDa. Considerare l'uso di controlli knockout ATG5 per confermare la specificità.
• Data l'alta reattività crociata con topo e ratto, questo anticorpo può essere utilizzato per studi in questi organismi modello.
• Per studi sull'autofagia, l'induzione del flusso autofagico (es. digiuno, inibitori mTOR) può alterare i livelli del coniugato ATG5; si raccomanda l'ottimizzazione delle condizioni di trattamento.
• Negli esperimenti correlati all'apoptosi, notare che l'espressione di ATG5 aumenta a valle dell'attività delle caspasi; potrebbe essere necessaria un'analisi temporale per catturare le modifiche.
• Per l'immunoprecipitazione e IF/ICC, verificare la compatibilità dell'anticorpo con il tuo tampone e le condizioni di fissazione, poiché ATG5 può essere associato alla membrana.

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