[KO Validato] Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-CD133 per WB, IF/ICC, IP, ELISA - O43490

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Prominina-1

• La Prominina-1 (conosciuta anche come AC133, CD133) è una glicoproteina transmembrana codificata dal gene PROM1; lo splicing alternativo genera multiple isoforme con distinte distribuzioni tissutali.
• È coinvolta nella differenziazione, proliferazione e apoptosi cellulare. Riferimenti correlati: PMID:24556617
• La proteina lega il colesterolo nei microdomini della membrana plasmatica e contribuisce all'organizzazione della membrana plasmatica apicale nelle cellule epiteliali.
• Durante lo sviluppo retinico precoce, la prominina-1 agisce come un regolatore chiave della morfogenesi dei dischi, sottolineando la sua importanza nella struttura dei fotorecettori.
• Nelle cellule di neuroblastoma, sopprime la differenziazione neuronale (crescita dei neuriti) in modo dipendente da RET. Riferimenti correlati: PMID:20818439
• La localizzazione subcellulare include la membrana cellulare apicale, microvilli, ciglia, segmenti esterni dei fotorecettori e il compartimento intermedio reticolo endoplasmatico–Golgi.
• L'isoforma 1 è un marker consolidato per le cellule staminali e progenitrici ematopoietiche CD34+, mentre l'isoforma 2 mostra un'espressione predominante nel fegato fetale, muscolo scheletrico, rene, cuore e nel pancreas, rene, fegato, polmone e placenta adulti.
• Sono state identificate modificazioni post-traduzionali come acetilazione, fosforilazione e glicosilazione, che possono influenzarne la funzione e il peso molecolare nei saggi.
• Le mutazioni in PROM1 sono associate a distrofie retiniche ereditarie, inclusa la distrofia cono-bastoncelli, la retinite pigmentosa e la malattia di Stargardt.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno (aa 179–433) è mirato al dominio extracellulare, probabilmente vantaggioso per la marcatura di superficie in IF/ICC; assicurarsi condizioni ottimali di fissazione e permeabilizzazione per gli studi di localizzazione cellulare.
• Per il western blot, notare che il CD133 è pesantemente glicosilato; la massa teorica è di ~97 kDa, ma la banda osservata può migrare più in alto. Utilizzare condizioni riducenti/denaturanti e validare con un controllo positivo (es. cellule staminali) insieme alla strategia di controllo negativo KO‑validato fornita.
• Quando si esegue l'immunoprecipitazione, sono consigliati tamponi di lisi blandi che preservino l'integrità delle proteine di membrana, e la concentrazione dell'anticorpo dovrebbe essere ottimizzata per ogni sistema sperimentale.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere valutato come reagente di cattura o di rilevamento; considerare l'accoppiamento con un anticorpo di rilevamento abbinato e validare con la proteina CD133 ricombinante.
• Essendo policlonale di coniglio, è possibile una variabilità da lotto a lotto; è buona pratica titolare ogni nuovo lotto per l'applicazione prevista e confermarne la specificità nella matrice di campione rilevante.

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