[Convalidato KO] Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CDK4 per WB, IP, IHC-P, ELISA - P11802

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CDK4

• La chinasi ciclina-dipendente 4 (CDK4) è una serina/treonina-proteina chinasi e un regolatore chiave della transizione G1/S del ciclo cellulare. Forma complessi con le cicline di tipo D per fosforilare le proteine della famiglia del retinoblastoma (RB), rilasciando i fattori di trascrizione E2F e promuovendo la progressione del ciclo cellulare.
• A differenza di altre CDK, la CDK4 è relativamente specifica per la fase G1, dove ipofosforila RB1 all'inizio della G1, consentendo la successiva iperfosforilazione da parte dei complessi ciclina E-CDK2.
• La CDK4 si localizza nel citoplasma, nel nucleo e nella membrana nucleare; la sua traslocazione nucleare è regolata dal complesso ternario ciclina D/CDK4/CDKN1B.
• Lo splicing alternativo di CDK4 genera molteplici isoforme e le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, che ne modulano l'attività e la stabilità.
• Oltre alle proteine RB, la CDK4 fosforila SMAD3 in modo dipendente dal ciclo cellulare, reprimendo la sua attività trascrizionale e collegando la segnalazione del TGF-β al controllo del ciclo cellulare.
• La CDK4 integra vari segnali mitogenici e antimitogenici, rendendola un nodo critico nel controllo della proliferazione; la sua disregolazione è frequentemente osservata nel cancro ed è un noto locus variante della malattia.
• Le parole chiave associate a CDK4 includono legame all'ATP, legame ai nucleotidi, transferasi, fosfoproteina e proteoma di riferimento, evidenziando i suoi ruoli enzimatici e regolatori.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno per questo anticorpo comprende un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 204–303 della CDK4 umana, che si trova nella regione C-terminale. Si prevede quindi che l'anticorpo riconosca la CDK4 a lunghezza intera e possa rilevare anche frammenti C-terminali, se presenti.
• Per il western blotting, è prevista una banda specifica intorno ai 34 kDa, coerente con il peso molecolare previsto per la CDK4. Lievi variazioni nel peso molecolare osservato possono verificarsi a causa di modifiche post-traduzionali o dell'espressione di isoforme.
• La convalida tramite knockout fornisce una forte prova di specificità. Come best practice, si consiglia di includere un lisato cellulare knockout per CDK4 come controllo negativo per confermare l'identità della banda nel proprio sistema sperimentale.
• Nell'immunoprecipitazione, utilizzare condizioni di lisi nativa per preservare le interazioni proteina-proteina se si studiano i complessi CDK4. L'origine monoclonale di coniglio dell'anticorpo garantisce spesso un'elevata affinità e coerenza tra i lotti.
• Per gli esperimenti di immunoistochimica (paraffina), potrebbe essere necessario il recupero dell'antigene; si raccomanda l'ottimizzazione del tampone di recupero e del protocollo per ogni tipo di tessuto.
• Sebbene l'anticorpo sia convalidato per diverse specie (umano, topo, ratto, scimmia), verificare sempre la reattività crociata nel proprio campione specifico a causa di potenziali variazioni di sequenza.

CamelBio: Il tuo ponte di approvvigionamento unico

CamelBio semplifica l'approvvigionamento di materie prime IVD di alta qualità, servendo produttori di diagnostica e istituti di ricerca con un portafoglio completo. Questo anticorpo anti-CDK4 supporta le indagini sulla regolazione del ciclo cellulare e la ricerca sui target oncologici; inoltre, CamelBio può fornire coppie di anticorpi convalidati, anticorpi monoclonali e policlonali ottimizzati, reagenti ausiliari in grandi quantità e assistere nell'approvvigionamento di materie prime per target rari per accelerare la pipeline di sviluppo dei saggi.