[Convalidato KO] Anticorpo monoclonale coniglio Anti-CDKN1A/p21 per WB, IHC-P, ELISA - P38936

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CDKN1A/p21

• CDKN1A/p21, noto anche come CIP1, WAF1, SDI1, MDA-6 e CAP20, è un importante inibitore delle chinasi dipendenti dalla ciclina coinvolto nella regolazione del ciclo cellulare.
• Gioca un ruolo critico nel controllo della progressione del ciclo cellulare e nell'arresto G2 indotto dai danni al DNA, mediando l'inibizione della proliferazione dipendente e indipendente da p53/TP53 (tramite CREB3L1). Riferimenti correlati: PMID:9106657
• CDKN1A si lega e inibisce l'attività delle chinasi dipendenti dalla ciclina, impedendo la fosforilazione di substrati critici per bloccare la progressione del ciclo cellulare. Modula anche l'assemblaggio e l'attività del complesso ciclina D-CDK4 in modo dipendente dalla dose.
• La proteina inibisce la sintesi del DNA competendo con POLD3 per il legame con PCNA, interrompendo la funzione della DNA polimerasi delta. Riferimenti correlati: PMID:11595739
• Nei cheratinociti, regola negativamente la fosforilazione di RB1 guidata da CDK4/6, portando al rilascio di E2F1 e alla trascrizione dei geni della fase G1/S.
• Localizzato sia nel nucleo che nel citoplasma, CDKN1A è espresso ubiquitariamente nei tessuti adulti, con livelli notevolmente più bassi nel cervello.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, acetilazione e ubiquitinazione, e presenta un dominio a dito di zinco per il legame dei metalli.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre la regione N-terminale (aa 1-164), che contiene i domini di legame CDK e PCNA, rendendo questo anticorpo un candidato per rilevare le interazioni funzionali.
• Per WB, considerare che p21 migra intorno a 18-21 kDa; si raccomandano controlli di carico come GAPDH o β-actina.
• Validare la reattività nei campioni di topo e ratto, poiché è riportata la reattività incrociata; confermare la specificità della banda nella specie di interesse.
• Per IHC-P, ottimizzare il recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo; può essere osservata sia la colorazione nucleare che citoplasmatica.
• Le applicazioni ELISA potrebbero richiedere la titolazione dell'anticorpo e dell'antigene per ottenere un rapporto segnale/rumore ottimale.

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