[KO Validated] Anticorpo monoclonale di coniglio PolymAb® anti-CDKN1A/p21 per WB, IF/ICC, ELISA - P38936 / P39689

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CDKN1A/p21

• CDKN1A/p21, anche noto come CIP1, WAF1, SDI1, MDA-6 e CAP20, è un inibitore delle chinasi ciclina-dipendenti che svolge un ruolo centrale nella regolazione del ciclo cellulare, nella senescenza e nelle risposte al danno al DNA.
• Si lega e inibisce i complessi delle chinasi ciclina-dipendenti (CDK), prevenendo la fosforilazione di substrati critici come RB1, bloccando così la progressione del ciclo cellulare ai checkpoint G1/S e G2/M.
• Svolge un ruolo importante nel controllo della progressione del ciclo cellulare e dell'arresto in G2 indotto dal danno al DNA, agendo a valle di p53/TP53 e anche in percorsi indipendenti da p53 mediati da CREB3L1 (per similarità).
  Riferimenti correlati:
  PMID:9106657
• Alle forchette di replicazione, p21 compete con POLD3 per il legame a PCNA, inibendo direttamente la sintesi del DNA da parte della DNA polimerasi delta e contribuendo alle risposte allo stress di replicazione.
  Riferimenti correlati:
  PMID:11595739
• Mostra funzioni duali: a bassa stechiometria promuove l'assemblaggio nucleare e l'attività chinasica dei complessi ciclina D-CDK4, mentre a rapporti più elevati inibisce lo stesso complesso (per similarità).
• La localizzazione subcellulare spazia sia nel nucleo, dove esercita funzioni canoniche di inibizione delle CDK e di regolazione trascrizionale, sia nel citoplasma, dove può influenzare l'apoptosi e la motilità.
• Espresso ubiquitariamente nei tessuti adulti, con livelli notevolmente inferiori nel cervello, coerente con il suo ampio ruolo nel controllo della proliferazione.
• Le modificazioni post-traduzionali tra cui fosforilazione e acetilazione modulano stabilità, localizzazione e interazioni; contiene anche un dominio zinc-finger, sottolineando la sua natura multifunzionale.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Come anticorpo monoclonale ricombinante di coniglio (PolymAb®), offre elevata consistenza lotto-a-lotto e specificità, adatto per WB, IF/ICC ed ELISA.
• Per il Western blot, validare utilizzando lisati da cellule con p21 elevato (ad es., colture trattate con danno al DNA o private di siero); le cellule knockout sono controlli negativi ideali per confermare la specificità.
• In immunocitochimica/immunofluorescenza, ottimizzare fissazione e permeabilizzazione; aspettarsi colorazione nucleare e citoplasmatica, e considerare la co-colorazione con marcatori di proliferazione.
• Per ELISA, l'accoppiamento con un anticorpo di cattura o la rilevazione diretta possono essere testati, assicurando la compatibilità con l'immunogeno ricombinante.
• La reattività con sia umano che topo rende questo anticorpo versatile per studi traslazionali; titolare sempre nel proprio sistema sperimentale.

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