[Convalidato KO] Anticorpo policlonale di coniglio Anti-CSDE1 per WB, IF/ICC, IP, ELISA - O75534

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CSDE1

• CSDE1, noto anche come proteina E1 con dominio a shock da freddo, UNR (proteina del gene a monte di N-ras) o D1S155E, è una proteina legante l'RNA contenente domini a shock da freddo. Lo splicing alternativo genera più isoforme, contribuendo alla sua diversità funzionale.
• È coinvolto in modo critico nel turnover dell'mRNA accoppiato alla traduzione, in particolare media la deadenilazione e la degradazione dell'mRNA di FOS tramite il determinante di instabilità principale della regione codificante (dominio mCRD) in concerto con altre proteine leganti l'RNA. Riferimenti correlati: PMID:11051545 PMID:15314026
• CSDE1 è richiesto per la formazione efficiente di granuli di stress citoplasmatici, che sono siti di smistamento dell'mRNA durante lo stress cellulare. Riferimenti correlati: PMID:29395067
• Durante l'infezione microbica da rinovirus umano, CSDE1 è necessario per l'iniziazione interna della traduzione dell'RNA virale.
• La proteina si localizza nel citoplasma e può essere trovata sia nei granuli di stress che nei corpi P, riflettendo il suo ruolo dinamico nel metabolismo dell'mRNA.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione e formazione di legami isopeptidici (ubiquitinazione), che possono regolare la sua attività e le sue interazioni.
• Gli studi strutturali hanno contribuito a caratterizzare l'architettura del dominio a shock da freddo di CSDE1, essenziale per il riconoscimento e il legame dell'RNA.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 369-600, situato nella regione C-terminale di CSDE1 umano. Questa regione può comprendere domini di legame all'RNA; pertanto, l'anticorpo può riconoscere la lunghezza completa e alcune isoforme. Convalidare nel proprio sistema di campioni specifico.
• Per Western blot (WB), ci si aspetta una banda di circa 89 kDa. La convalida KO conferisce la specificità; considerare l'utilizzo di un lisato cellulare KO come controllo negativo per verificare l'identità della banda.
• Per immunofluorescenza (IF/ICC) e immunoprecipitazione (IP), confermare la localizzazione subcellulare e il legame in condizioni fisiologiche pertinenti. Ottimizzare la fissazione e la permeabilizzazione per IF.
• Per ELISA, considerare un protocollo indiretto standard e titolare sia l'antigene di rivestimento che la concentrazione di anticorpo per determinare le condizioni di lavoro ottimali.
• La reattività crociata riportata include uomo e topo. Per altre specie, verificare l'omologia di sequenza nella regione dell'immunogeno prima dell'uso.

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