[Convalidato KO] Anticorpo policlonale coniglio anti-Citocheratina 20 (KRT20) per WB, IF/ICC, ELISA - P35900

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Citocheratina 20

• La Citocheratina 20 (KRT20), nota anche come CK-20, K20 o Proteina IT, è una proteina dei filamenti intermedi di cheratina di tipo I che forma eterodimeri con le cheratine di tipo II per assemblare la rete del citoscheletro nelle cellule epiteliali.
• Gioca un ruolo critico nel mantenere l'organizzazione dei filamenti di cheratina specificamente nell'epitelio intestinale, contribuendo all'integrità cellulare e alla resilienza meccanica.
• Dopo la fosforilazione, KRT20 partecipa alla regolazione della secrezione di mucina nell'intestino tenue, collegando la dinamica della cheratina alle funzioni secretorie nell'intestino.
• La proteina è codificata dal gene KRT20 e appartiene alla grande famiglia dei geni della cheratina, che include multiple isoforme specifiche per i tessuti.
• A livello subcellulare, KRT20 si localizza nel citoplasma, dove si integra nella rete dei filamenti intermedi.
• L'espressione è prevalentemente limitata all'epitelio intestinale, incluse le cellule luminari della mucosa colica, ma viene rilevata anche nelle cellule di Merkel della mucosa orale cheratinizzata (gengivale, palatale e papille gustative della lingua).
• Le modifiche post-traduzionali, in particolare la fosforilazione, modulano la sua funzione; la proteina è classificata come fosfoproteina ed è associata all'apoptosi, alle strutture a bobina avvolta (coiled-coil) e all'identificazione del proteoma di riferimento.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per l'analisi WB, considerare l'uso di lisati cellulari totali da linee cellulari epiteliali intestinali come Caco-2 o HT-29, o omogenati tessutali da colon o intestino tenue. Convalidare l'anticorpo nella matrice specifica del campione, poiché l'intensità del segnale può variare.
• In IF/ICC, assicurarsi di un'adeguata permeabilizzazione per consentire all'anticorpo l'accesso alla rete dei filamenti intermedi citoplasmatica. La colorazione simultanea con altri marcatori epiteliali (es. E-caderina) può aiutare a confermare il contesto tissutale.
• Poiché l'immunogeno copre gli aminoacidi 245–424 del dominio a bastone centrale, l'anticorpo potrebbe riconoscere sia le forme fosforilate che quelle non fosforilate. Per studi dipendenti dalla fosforilazione, si raccomanda una convalida ortogonale.
• La reattività crociata riportata con topo e ratto suggerisce l'utilità in comuni organismi modello; tuttavia, verificare la reattività specifica per la specie nel proprio setup sperimentale, specialmente per tessuti non umani.

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