[Convalidato KO] Anticorpo policlonale Anti-EBP1/PA2G4 per WB, IHC-P, ELISA - Q9UQ80

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di EBP1/PA2G4

• EBP1/PA2G4, codificato dal gene PA2G4, è noto anche come proteina 2G4 associata alla proliferazione, proteina legante ErbB3 1 e omologo della proteina p38-2G4 del ciclo cellulare. Esiste come multiple isoforme dovute allo splicing alternativo, con l'isoforma 1 e l'isoforma 2 che sono le varianti predominanti.
• Funziona nella trasduzione del segnale regolata da ERBB3 e agisce come corepressore del recettore degli androgeni (AR). La sua attività è regolata dal ligando di ERBB3 neuregulina-1/heregulina. Inibisce la trascrizione di alcuni promotori regolati da E2F1, probabilmente reclutando attività istone acetilasi.
• La proteina lega l'RNA e si associa a rRNA maturi 28S, 18S e 5.8S, diversi precursori rRNA e RNA nucleolare piccolo U3. È coinvolta nella regolazione dei passaggi intermedi e tardivi della lavorazione del rRNA e potrebbe partecipare all'assemblaggio dei ribosomi.
• EBP1/PA2G4 media la traduzione indipendente dal cappuccio di specifici IRES virali e regola la proliferazione cellulare, la differenziazione e la sopravvivenza. L'isoforma 1 sopprime l'apoptosi, mentre l'isoforma 2 promuove la differenziazione cellulare (Per somiglianza).
• A livello subcellulare, si localizza nel citoplasma, nel nucleo e nel nucleolo.
• A livello proteico, l'isoforma 2 è non rilevabile nelle cellule cancerose, mentre l'isoforma 1 è fortemente espressa. Entrambe le isoforme sono ampiamente espresse nei tessuti inclusi cuore, cervello, polmone, pancreas, muscolo scheletrico, rene, placenta e fegato.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione. È una fosfoproteina e subisce la formazione di legami isopeptidici e coniugazione Ubl.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1–394 dell'EBP1/PA2G4 umano, che potrebbe rilevare entrambe le isoforme se gli epitopi sono conservati. Considerare la validazione della specificità utilizzando controlli specifici per l'isoforma.
• Per il Western blot, ci si aspetta una banda vicino al peso molecolare calcolato di 44 kDa. Possono essere utilizzati lisati da linee cellulari umane, murine o di ratto; le linee cellulari cancerose con alta espressione dell'isoforma 1 possono fornire segnali forti.
• In IHC-P, potrebbe essere necessaria l'ottimizzazione del recupero dell'antigene. Validare i pattern di colorazione in tessuti noti positivi, come sezioni tumorali.
• Per le applicazioni ELISA, abbinare a un sistema di rilevazione appropriato. I dati di validazione KO indicano che la riduzione del segnale nelle cellule knockout può servire come test confermativo utile.

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