[Convalidato KO] Anticorpo policlonale coniglio anti-ECE1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P42892

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ECE1

• L'enzima di conversione dell'endotelina 1 (ECE1) è una metalloproteasi dipendente dallo zinco che catalizza la conversione della big endotelina-1 in endotelina-1, un peptide vasoattivo potente.
• ECE1 è una proteina di membrana di tipo II a passaggio singolo localizzata principalmente alla membrana cellulare, dove esercita la sua attività enzimatica.
• Lo splicing alternativo genera multiple isoforme (A, B, C, D) che mostrano pattern di espressione tessuto-specifici, inclusi nelle cellule endoteliali, cuore, placenta e rene.
• L'enzima è implicato nell'omeostasi e nella patogenesi cardiovascolare, con ruoli nella regolazione della pressione sanguigna e nel rimodellamento vascolare.
• Le modifiche post-traduzionali includono la N-glicosilazione e la fosforilazione, che possono modulare l'attività enzimatica e la stabilità.
• Le mutazioni nel gene ECE1 sono collegate alla malattia di Hirschsprung, evidenziando la sua importanza nello sviluppo del sistema nervoso enterico.
• UniProt annota ECE1 con parole chiave come signal-anchor, legame disolfuro e variante della malattia, indicando caratteristiche strutturali e rilevanza clinica.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (amminoacidi 670–770) di ECE1 umano, che condivide alta omologia tra umano, mouse e ratto, supportando la reattività incrociata osservata.
• Per il western blotting, è prevista una banda a circa 87 kDa; tuttavia, la variazione delle isoforme e le modifiche post-traduzionali possono causare spostamenti nella migrazione. Considerare l'ottimizzazione delle condizioni riducenti.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), è raccomandato il recupero dell'antigene a causa della natura transmembrana del bersaglio. Utilizzare controlli tissutali appropriati che esprimono ECE1, come rene o cuore.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), è richiesta la permeabilizzazione per accedere all'epitopo intracellulare. Validare la localizzazione della colorazione alla membrana cellulare.
• Quando si imposta un ELISA, abbinare con un anticorpo di cattura ben caratterizzato e utilizzare uno standard ricombinante ECE1 per la quantificazione.

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