Anticorpo policlonale KO convalidato Anti-EHMT2 per WB, IP, ELISA - Q96KQ7

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di EHMT2

• EHMT2, noto anche come G9a, BAT8 o KMT1C, è una istone-lisina N-metiltransferasi codificata dal gene EHMT2 (ID gene: 10919) e appartiene alla famiglia delle metiltransferasi con dominio SET.
• Agisce come mono- e dimetiltransferasa eucromatica dell'H3K9 (H3K9me1/H3K9me2), creando un marchio epigenetico repressivo letto dalle proteine HP1 per silenziare la trascrizione. Riferimenti correlati: PMID:11316813 PMID:20084102
• EHMT2 effettua anche la monometilazione dell'istone H3 in posizione Lis-56 (H3K56me1) durante la fase G1, facilitando l'interazione con PCNA e la replicazione del DNA. Riferimenti correlati: PMID:22387026
• Metila anche debolmente H3K27 e modifica l'istone H1.4 in posizione Lis-26, ampliando il suo repertorio di substrati istonici. Riferimenti correlati: PMID:11316813 PMID:19144645
• Oltre agli istoni, EHMT2 metila substrati non istonici tra cui p53 (Lis-373), CDYL, WIZ, DNMT1 e HDAC1, e subisce l'autometilazione. Riferimenti correlati: PMID:20118233 PMID:18438403
• La proteina è necessaria per la metilazione del DNA indipendentemente dalla sua attività di istone metiltransferasi.
• EHMT2 si localizza nel nucleo e sui cromosomi, coerentemente con il suo ruolo nella regolazione della cromatina.
• È ampiamente espresso con i livelli più alti nel fegato fetale, timo, linfonodi, milza e leucociti del sangue periferico.
• Strutturalmente, EHMT2 contiene ripetizioni ankirina, un dominio SET e motivi a dito di zinco, e viene classificato come metiltransferasi dipendente da S-adenosil-L-metionina e che lega metalli.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 877–1176 (regione C-terminale) di EHMT2 umano; si consiglia di verificare la reattività nel proprio sistema modello specifico, poiché gli epitopi possono essere conservati tra specie o isoforme.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 132 kDa; utilizzare un marcatore di peso molecolare ad alto intervallo e una percentuale di gel appropriata (ad esempio, 8% di SDS-PAGE) per una risoluzione ottimale.
• Nell'immunoprecipitazione, testare la concentrazione dell'anticorpo e le condizioni di incubazione (ad esempio, 1–2 µg per 500 µg di lisato) per ottimizzare l'efficienza di cattura e ridurre il segnale di fondo.
• Per l'ELISA, rivestire l'antigene a 1–10 µg/mL e titolare l'anticorpo per determinare la diluizione di lavoro ottimale; includere controlli negativi appropriati.
• Il fornitore riporta la convalida mediante knockout per questo anticorpo, a supporto della sua specificità per la rilevazione di EHMT2 endogeno; confermare l'identità del bersaglio mediante silenziamento con siRNA o linee cellulari knockout quando necessario.

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