Anticorpo policlonale anti-GIT1 convalidato KO per WB, IF/ICC, ELISA - Q9Y2X7

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di GIT1

• GIT1 (ARF GTPase-activating protein GIT1), nota anche come p95-APP1 e CAT1, è una proteina scaffold multidominio che partecipa all'internalizzazione dei recettori, al rimodellamento delle adesioni focali e alla segnalazione mediata da recettori accoppiati a proteine G e recettori tirosin chinasici.
• Attraverso l'attivazione di PAK1, GIT1 regola positivamente la nucleazione dei microtubuli durante l'interfase e svolge un ruolo nella citochinesi tramite una via che coinvolge ENTR1 e PTPN13.
  Riferimenti correlati:
  PMID:27012601, PMID:23108400
• GIT1 promuove la motilità cellulare regolando la dinamica dei complessi di adesione e attivando localmente RAC1. Dopo la stimolazione con EGF, recluta anche MAPK1/3/ERK1/2 verso le adesioni focali, stimolando la migrazione cellulare.
  Riferimenti correlati:
  PMID:10938112, PMID:11896197, PMID:15923189
• GIT1 è fondamentale per la morfogenesi delle spine dendritiche e la formazione delle sinapsi. Nei neuroni dell'ippocampo, recluta ARHGEF7/beta-PIX per attivare localmente RAC1, un passaggio essenziale per la morfogenesi delle spine e la formazione sinaptica. Regola inoltre la stabilità sinaptica del recettore GABA(A) coordinando l'attività di RAC1 e PAK1, determinando la stabilizzazione dell'actina filamentosa e mantenendo la trasmissione sinaptica inibitoria.
  Riferimenti correlati:
  PMID:12695502, PMID:15800193, PMID:25284783
• GIT1 è essenziale per la segnalazione VEGF attraverso l'attivazione della fosfolipasi C-gamma e di ERK1/2, controllando la proliferazione delle cellule endoteliali e l'angiogenesi. È inoltre richiesta per la rigenerazione ossea, in parte grazie alla regolazione della segnalazione NF-kappa-B nelle cellule staminali mesenchimali che aumenta la produzione di VEGFA.
  Riferimenti correlati:
  PMID:19273721, PMID:31502302
• Localizzazione subcellulare: GIT1 si trova nel citoplasma, nella sinapsi (presinaptica e postsinaptica), nella densità postsinaptica, nelle adesioni focali, nel lamellipodio, nel centrosoma e nel polo del fuso mitotico.
• Caratteristiche strutturali: Contiene ripetizioni ANK, un dominio a coil coil e un dito di zinco; va incontro a splicing alternativo e fosforilazione.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 460–640 di GIT1 umana, una regione centrale che può riconoscere epitopi conservati tra tutte le isoforme conosciute e diverse specie.
• Per Western blot, il peso molecolare previsto è ~84 kDa; possono comparire bande aggiuntive per splicing alternativo o modifiche post-traduzionali. Convalidare l'anticorpo nel sistema di campionamento di interesse.
• Per immunofluorescenza/ICC, considerare condizioni di fissazione e permeabilizzazione adatte alle strutture del citoscheletro e delle adesioni focali; la co-colorazione con marcatori per l'actina filamentosa o le proteine delle adesioni focali può essere utile.
• Le applicazioni ELISA possono richiedere l'ottimizzazione dell'antigene di coating e della diluizione dell'anticorpo per ottenere la sensibilità e specificità desiderate.
• La reattività incrociata con GIT1 di topo e ratto è supportata dai dati del fornitore; tuttavia, i livelli di espressione endogena e le isoforme tessuto-specifiche devono essere verificati sperimentalmente.

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