[KO Validato] Anticorpo monoclonale anti-GSDME (lunghezza completa+terminale N) per WB, IP, IHC-P, ELISA - O60443

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della gasdermina-E

• La gasdermina-E (GSDME/DFNA5/ICERE-1) è il precursore di una proteina che forma pori e che, in seguito al clivaggio da parte di CASP3 o della granzima B, induce la piroptosi, una forma di morte cellulare programmata distinta dall'apoptosi. Riferimenti correlati: PMID:27281216, PMID:28459430, PMID:32188940, PMID:33852854
• Il frammento N-terminale clivato trasloca sulla membrana plasmatica, forma omooligomeri e crea pori del diametro di 10–15 nm, facilitando il rilascio di IL-1β e IL-18 e inducendo la piroptosi. Riferimenti correlati: PMID:28459430, PMID:32188940, PMID:33852854
• La GSDME media il passaggio dall'apoptosi dipendente dalla caspasi-3 alla piroptosi in risposta al TNF, ai farmaci chemioterapici e alle infezioni virali, promuovendo così la morte cellulare infiammatoria e l'immunità antitumorale. Riferimenti correlati: PMID:27281216, PMID:28459430, PMID:32188940, PMID:28045099
• In qualità di soppressore tumorale, la GSDME viene clivata dalla granzima B rilasciata dalle cellule natural killer, inducendo la piroptosi nelle cellule tumorali bersaglio e potenziando le risposte immunitarie antitumorali. Riferimenti correlati: PMID:21522185, PMID:31953257, PMID:32188940
• La GSDME mostra inoltre attività battericida e potrebbe svolgere un ruolo nella risposta al danno del DNA mediata da p53/TP53. Riferimenti correlati: PMID:27281216, PMID:16897187
• È espressa in molteplici tessuti, con la massima espressione nella placenta e nella coclea, in linea con il suo coinvolgimento nella perdita dell'udito e nelle patologie correlate alla gravidanza. Riferimenti correlati: PMID:9771715
• Le modifiche post-traduzionali includono palmitoilazione e formazione di legami isopeptidici; lo splicing alternativo genera isoforme con pesi molecolari variabili.
• La proteina a lunghezza completa ha un peso molecolare previsto di circa 55 kDa, mentre lo splicing alternativo e il clivaggio producono frammenti di circa 11 kDa e 35 kDa.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 245–344, situati nella regione N-terminale della GSDME. Questa regione è fondamentale per la formazione dei pori ed è conservata nei frammenti attivi clivati.
• Durante l'esecuzione del Western blot (WB), considerare che possono essere osservate più bande intorno a 11 kDa, 35 kDa e 55 kDa a causa dello splicing alternativo e dell'elaborazione proteolitica. Convalidare l'identificazione delle bande con controlli appropriati.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), assicurarsi che le condizioni di recupero antigenico siano ottimizzate per il rilevamento della GSDME localizzata sulla membrana e nel citosol in tessuti fissati in formalina e inclusi in paraffina.
• Nelle applicazioni di immunoprecipitazione (IP) ed ELISA, la natura monoclonale di questo anticorpo garantisce un'elevata specificità, ma la reattività crociata con altri membri della famiglia delle gasdermine deve essere esclusa utilizzando controlli knockout o siRNA appropriati.

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