[Convalidato KO] Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-Hexokinase-1 (HK1) per WB, IP, IHC-P, ELISA - P19367

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'Hexokinase-1

• L'Hexokinase-1 (HK1, nota anche come esochinasi cerebrale, HK I, HK-A) è un enzima glicolitico di ~102 kDa che catalizza la fosforilazione degli esosi, principalmente il glucosio, per produrre glucosio-6-fosfato nella fase iniziale della glicolisi.
• HK1 è essenziale per il metabolismo glucidico, fosforila D-glucosio, D-glucosammina, D-fruttosio, D-mannosio e 2-deossi-D-glucosio, ma non N-acetil-D-glucosammina (PubMed:1637300, PubMed:25316723, PubMed:27374331). Riferimenti correlati: PMID:1637300 PMID:25316723 PMID:27374331
• Oltre al suo ruolo metabolico, HK1 agisce come recettore di riconoscimento di pattern per il peptidoglicano batterico; l'N-acetil-D-glucosammina citosolica derivata dal peptidoglicano inibisce la sua attività esochinasica e innesca la dissociazione dalla membrana mitocondriale esterna, portando all'attivazione dell'inflammasoma NLRP3 e alle risposte immunitarie innate (PubMed:27374331). Riferimenti correlati: PMID:27374331
• HK1 si localizza prevalentemente sulla membrana mitocondriale esterna, con una frazione minore nel citosol. Questo legame collega la glicolisi alla produzione di ATP mitocondriale e influenza la segnalazione metabolica.
• Esistono più isoforme di HK1 grazie allo splicing alternativo: l'isoforma 1 è ampiamente espressa, l'isoforma 2 è specifica per gli eritrociti, mentre le isoforme 3 e 4 sono specifiche per i testicoli (PubMed:10978502). Riferimenti correlati: PMID:10978502
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, che possono regolare la sua attività e la localizzazione subcellulare. HK1 è anche un enzima allosterico e una chinasi legante l'ATP.
• Le mutazioni nel gene HK1 sono associate a patologie come la malattia di Charcot-Marie-Tooth, l'anemia emolitica ereditaria, la disabilità intellettiva e la retinite pigmentosa, evidenziando la sua importanza fisiologica critica.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 50–150 dell'Hexokinase-1 umana, una regione che potrebbe essere conservata tra le specie. Gli utenti che lavorano con campioni di topo o ratto devono verificare la reattività incrociata nel loro sistema modello.
• Per il Western blotting, è prevista una banda vicino a 102 kDa; si consiglia di utilizzare condizioni riducenti e controlli di caricamento appropriati per le proteine mitocondriali.
• Nelle applicazioni di immunoprecipitazione e immunofluorescenza, tenere conto che HK1 è localizzata principalmente sulla membrana mitocondriale esterna; la permeabilizzazione e l'arricchimento degli organelli possono migliorare la rilevazione.
• Per l'immunoistochimica (IHC), le condizioni di recupero dell'antigene e i metodi di fissazione devono essere ottimizzati per antigeni mitocondriali. Titolare l'anticorpo nei tipi di tessuto corrispondenti.
• L'anticorpo è adatto per ELISA; nella progettazione di saggi quantitativi, includere standard appropriati e convalidare la linearità e la sensibilità nella matrice di campione specifica.

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