Anticorpo policlonale rabbit KO Validato anti-HMGB1 per WB, IHC-P, ELISA - P09429

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di HMGB1

• HMGB1 (High mobility group protein B1), codificato dal gene HMGB1, è una proteina ubiquitina associata alla cromatina non istonica che viene anche secreta attivamente o rilasciata passivamente per agire come pattern molecolare di pericolo (DAMP) e citochina/chemochina.
• Nel nucleo, HMGB1 si lega preferenzialmente a strutture di DNA non canoniche (a filamento singolo, cruciforme, superavvolto e Z-DNA) e piega il DNA per facilitare il rimodellamento della cromatina e aumentare l'accesso ai fattori di trascrizione (PubMed:20123072). Partecipa a molteplici vie di riparazione del DNA, tra cui la riparazione per escissione di nucleotidi, la riparazione di mismatch e la riparazione per escissione di basi (PubMed:15014079, PubMed:16143102, PubMed:17803946, PubMed:19360789, PubMed:19446504). Riferimenti correlati: PMID:20123072 PMID:15014079 PMID:16143102 PMID:17803946 PMID:19360789 PMID:19446504
• Nel citoplasma, HMGB1 promuove l'autofagia rompendo in modo competitivo l'interazione BECN1:BCL2 (PubMed:20819940) ed è coinvolto nell'autofagia indotta da stress ossidativo (PubMed:21395369). Riferimenti correlati: PMID:20819940 PMID:21395369
• Extracellolarmente, lo stato redox di HMGB1 ne determina la funzione: HMGB1 completamente ridotto agisce come chemochina, la forma disolfuro come citochina proinfiammatoria e la forma solfonilica promuove la tolleranza immunologica (PubMed:23446148, PubMed:23519706, PubMed:23994764). Interagisce con molteplici recettori di superficie, tra cui AGER/RAGE, TLR2 e TLR4, per indurre il rilascio di citochine e il reclutamento di cellule immunitarie (PubMed:12765338, PubMed:18354232, PubMed:19264983, PubMed:15607795, PubMed:20547845). Riferimenti correlati: PMID:23446148 PMID:23519706 PMID:23994764 PMID:12765338 PMID:18354232 PMID:19264983 PMID:15607795 PMID:20547845
• HMGB1 facilita l'ingresso di SARS-CoV e SARS-CoV-2 regolando l'espressione dei recettori virali ACE2 e CTSL attraverso la modulazione della cromatina (PubMed:33147444) ed è richiesto per la reticulofagia indotta da ORF3A di SARS-CoV-2 (PubMed:35239449). Riferimenti correlati: PMID:33147444 PMID:35239449
• Le modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione, fosforilazione, ADP-ribosilazione e ossidazione, regolano dinamicamente la localizzazione subcellulare, l'affinità di legame al DNA e le attività immunomodulatorie di HMGB1.
• HMGB1 è espresso in modo ubiquitino ed è stato rilevato nelle piastrine (PubMed:11154118). Riferimenti correlati: PMID:11154118

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 69-168, includendo la scatola HMG B conservata e parte della coda C acida. Questa regione è altamente conservata tra uomo, topo e ratto, e supporta la reattività crociata dell'anticorpo.
• Per Western blot è attesa una banda intorno a 25 kDa; si noti che le modifiche post-traduzionali possono causare lievi spostamenti. È stata eseguita la convalida su knockout; si consiglia di includere controlli positivi e negativi appropriati.
• Per IHC-P, può essere necessario il recupero dell'antigene. Ottimizzare le condizioni di colorazione utilizzando controlli di tessuto positivi noti (ad esempio, tessuti con elevata espressione di HMGB1 come organi linfoidi o tumori).
• In ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per la cattura o la rilevazione; tuttavia, l'accoppiamento con un anticorpo di rilevazione corrispondente deve essere convalidato per il formato specifico del saggi.
• Poiché HMGB1 è un DAMP che può essere rilasciato dalle cellule danneggiate, evitare una lisi cellulare o un danno tissutale eccessivo durante la preparazione del campione per minimizzare il fondo.

CamelBio: il tuo ponte di approvvigionamento one-stop

CamelBio supporta i produttori di diagnostica e i laboratori di ricerca con l'approvvigionamento end-to-end di materie prime per IVD. Per la ricerca su infiammazione correlata a HMGB1, cancro e malattie infettive, forniamo coppie di anticorpi convalidati, anticorpi monoclonali e policlonali ottimizzati e reagenti ausiliari sfusi, potenziando lo sviluppo del vostro test dal concetto alla clinica.