[Convalidato KO] Anticorpo policlonale di coniglio anti-HPRT1 per WB, ELISA - P00492

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di HPRT1

• HPRT1 codifica per l'ipoxantina-guanina fosforibosiltransferasi (HGPRT), un enzima centrale nel pathway di recupero delle purine.
• L'enzima catalizza la conversione dell'ipoxantina in inosina monofosfato (IMP) e della guanina in guanosina monofosfato (GMP) utilizzando il 5-fosforibosil-1-pirofosfato (PRPP) come donatore di fosforibosile.
• Si localizza principalmente nel citoplasma, dove media il riciclo delle basi puriniche dagli acidi nucleici degradati.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, che possono regolare l'attività o la stabilità dell'enzima.
• Il legame con il metallo (magnesio) e il legame con i nucleotidi sono critici per la funzione catalitica, come indicato dalle parole chiave di UniProt.
• Le mutazioni in HPRT1 sono associate a fenotipi patologici, inclusa la gotta, sottolineando la sua importanza fisiologica nel metabolismo delle purine.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 1-218 della HPRT1 umana a lunghezza intera, suggerendo un ampio riconoscimento dell'epitopo per la rilevazione.
• Per il Western blot (WB), è attesa una banda specifica a circa 25 kDa; convalidare utilizzando lisati di controllo positivo e negativo pertinenti.
• La convalida knockout (KO) dell'anticorpo aumenta la fiducia nella specificità del target; considerare l'inclusione di linee cellulari o tessuti KO nei disegni sperimentali.
• Le applicazioni ELISA possono essere ottimizzate accoppiando l'anticorpo con anticorpi secondari appropriati e utilizzando curve standard derivate da proteine ricombinanti.
• La reattività crociata con ortologhi di topo e ratto consente studi multispecie, ma verificare la coerenza tra i lotti ed eseguire una convalida specifica per la specie.

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