[Convalidato KO] Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-IDH1 per WB, IF/ICC, IP, ELISA - O75874

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di IDH1

• IDH1 codifica per la deidrogenasi NADP-dipendente dell'isocitrato citoplasmatica (IDH1), nota anche come IDPc o ossalosuccinato decarbossilasi, che catalizza la decarbossilazione ossidativa dell'isocitrato in α-chetoglutarato con concomitante produzione di NADPH (PubMed:10521434, PubMed:19935646).
  Riferimenti correlati: PMID:10521434 PMID:19935646
• L'enzima richiede ioni metallici bivalenti come Mg²⁺ o Mn²⁺ come cofattori e appartiene alla famiglia delle deidrogenasi dell'isocitrato/isopropilmalato, con ruoli chiave nel ciclo dell'acido tricarbossilico e nell'omeostasi redox cellulare.
• IDH1 è localizzata prevalentemente nel citoplasma e nel citosol, e si trova anche nei perossisomi, dove può fornire NADPH per reazioni perossisomiali come l'attività della fitanoil-CoA diossigenasi.
• Producendo NADPH, IDH1 supporta la biosintesi riduttiva, inclusa la sintesi lipidica, e aiuta a mantenere l'ambiente riducente cellulare contro lo stress ossidativo.
• La proteina è soggetta a modificazioni post-traduzionali, inclusa acetilazione e fosforilazione, che possono modulare la sua attività enzimatica e la distribuzione subcellulare.
• IDH1 può funzionare come cristallino dell'epitelio corneale, contribuendo potenzialmente al mantenimento della trasparenza corneale (Per somiglianza).
• Il peso molecolare calcolato del monomero maturo di IDH1 è di circa 46.7 kDa, coerente con la banda osservata intorno a 47 kDa nel Western blotting.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende la proteina IDH1 umana a lunghezza intera (aa 1–414), suggerendo che l'anticorpo possa riconoscere sia le conformazioni native che denaturate. Per il Western blotting, dovrebbe essere osservata una banda attesa vicino a 47 kDa; convalidare utilizzando controlli positivi e negativi appropriati, poiché questo anticorpo è convalidato KO.
• Nell'immunoprecipitazione (IP), utilizzare un protocollo standard con lisati cellulari da tessuti o linee cellulari che esprimono IDH1. Confermare il recupero mediante Western blotting con un anticorpo diverso o mediante spettrometria di massa.
• Per l'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), prevedere un pattern di colorazione prevalentemente citoplasmatico con possibili punteggiature perossisomiali. Includere condizioni di fissazione e permeabilizzazione appropriate e verificare la specificità utilizzando cellule di controllo knockout per IDH1, se disponibili.
• Questo anticorpo reagisce in modo incrociato con IDH1 di topo e ratto, rendendolo adatto per studi su modelli roditori. Convalidare sempre i livelli di espressione nel tessuto specifico o nel sistema cellulare in esame.
• Per l'ELISA, considerare l'abbinamento con un anticorpo di rilevamento corrispondente o utilizzare l'anticorpo sia come cattura che come rivelazione in un formato sandwich, assicurando una reattività incrociata minima con altri isoforme della deidrogenasi dell'isocitrato (es. IDH2, IDH3).

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