[Convalidato KO] Anticorpo monoclonale di coniglio anti-IRF3 per WB - Q14653

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di IRF3

• IRF3 è un regolatore trascrizionale chiave delle risposte immunitarie dipendenti dall'interferone di tipo I (IFN) e svolge un ruolo critico nella difesa immunitaria innata contro i virus a DNA e RNA. Riferimenti correlati: PMID:22394562 PMID:24049179 PMID:25636800
• Nelle cellule non infettate, IRF3 risiede nel citoplasma in forma inattiva. Dopo l'infezione virale o la segnalazione tramite i recettori Toll-like (TLR), viene fosforilato dalle chinasi IKBKE e TBK1, innescando la dimerizzazione e la traslocazione nucleare. Riferimenti correlati: PMID:22394562 PMID:25636800 PMID:27302953
• IRF3 attivato si associa alla proteina legante il CREB (CREBBP) per formare il complesso fattore 1 attivato da dsRNA (DRAF1), che lega gli elementi di risposta stimolati dall'interferone (ISRE) e guida la trascrizione dell'IFN di tipo I e dei geni stimolati dall'interferone (ISG). Riferimenti correlati: PMID:16154084 PMID:27302953 PMID:33440148
• IRF3 può essere reclutato ai mitocondri tramite TOMM70:HSP90AA1, formando un complesso apoptotico che induce la morte cellulare programmata in risposta a determinate infezioni virali. Riferimenti correlati: PMID:25609812
• La localizzazione subcellulare comprende citoplasma, nucleo e mitocondrio. IRF3 si sposta tra i diversi compartimenti in base al suo stato di attivazione.
• È espresso costitutivamente in un'ampia varietà di tessuti, garantendo una sorveglianza antivirale capillare.
• Modifiche post-traduzionali come fosforilazione, acetilazione e ubiquitinazione regolano l'attività, la stabilità e l'interazione di IRF3 con altre proteine.
• Lo splicing alternativo genera più isoforme, che possono modulare la funzione di IRF3 in diversi contesti cellulari.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'anticorpo bersaglia un epitopo compreso tra gli amminoacidi 50–150 dell'IRF3 umano; verificare la specificità utilizzando la linea di prodotti convalidati KO o tramite knockdown/knockout nel proprio sistema sperimentale.
• Per Western blot, aspettarsi una banda a circa 47 kDa. Utilizzare controlli positivi come lisati cellulari infettati da virus o stimolati con poly(I:C) per migliorare la rilevazione dell'IRF3 endogeno.
• Nelle applicazioni ELISA, provare a utilizzare l'anticorpo come reagente di cattura o di rilevamento in combinazione con una coppia di anticorpi IRF3 abbinata, e validare il risultato con la proteina IRF3 ricombinante.
• Poiché IRF3 funziona nell'immunità innata, attivare le vie di segnalazione con ligandi come poly(I:C) o il virus Sendai per studiare la fosforilazione e la traslocazione in modelli umani o murini.

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