[Convalidato KO] Anticorpo monoclonale di coniglio anti-KEAP1 (INrf2/KLHL19) - Q14145

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di KEAP1

• KEAP1 (proteina 1 associata a ECH di tipo Kelch), nota anche come INrf2 o KLHL19, è un adattatore specifico per substrato del complesso E3 ubiquitina ligasi BCR (BTB-CUL3-RBX1).
• Regola la risposta allo stress ossidativo indirizzando il fattore di trascrizione NFE2L2/NRF2 all'ubiquitinazione e alla degradazione proteasomica in condizioni normali. Riferimenti correlati: PMID:14585973 PMID:15379550 PMID:15572695
• Lo stress ossidativo o elettrofilo innesca la modificazione covalente dei residui di cisteina reattivi in KEAP1, inattivando la ligasi e permettendo a NRF2 di accumularsi e attivare geni citoprotettivi. Riferimenti correlati: PMID:16006525 PMID:17127771 PMID:18251510
• KEAP1 media anche l'ubiquitinazione di substrati come SQSTM1/p62, BPTF e PGAM5, ed è coinvolta nelle vie dell'autofagia selettiva. Riferimenti correlati: PMID:15379550 PMID:17046835 PMID:20452972 PMID:28380357
• È localizzata sia nel citoplasma che nel nucleo.
• È espressa in modo diffuso, con i livelli più alti nel muscolo scheletrico.
• Contiene ripetizioni Kelch e un dominio BTB; è classificata nelle vie di interazione ospite-virus, S-nitrosilazione e coniugazione Ubl.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (aa 525-624) della KEAP1 umana, che include i domini a ripetizione Kelch critici per il legame con il substrato. Questa regione è ben conservata, e ciò supporta la reattività crociata con topo e ratto.
• Per Western blotting è prevista una banda intorno ai 70 kDa. Si consideri che modificazioni post-traduzionali (ad esempio ubiquitinazione) o modificazioni ossidative possono alterare leggermente la migrazione.
• Per IF/ICC si può osservare una colorazione sia citoplasmatica che nucleare, a seconda delle condizioni di stress cellulare.
• L'anticorpo è stato convalidato tramite KO, e ciò conferma la specificità; tuttavia, è sempre necessario convalidarlo nel proprio sistema di campioni specifico e includere controlli appropriati.
• Per ELISA, è necessario confermare il legame diretto al peptide immunogeno; l'abbinamento con un anticorpo di cattura può richiedere ottimizzazione.

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