[Validato KO] Anticorpo monoclonale anti-Ki67 per WB, IF/ICC, IHC-P, mIHC, ELISA - P46013

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Ki67

• Ki-67, codificato dal gene MKI67, è anche noto come KIA, MIB-1 e PPP1R105. Si tratta di una grande proteina nucleare ricca di prolina (~359 kDa) che funge da marcatore universale di proliferazione.
• È necessario per mantenere i singoli cromosomi mitotici dispersi nel citoplasma dopo la disassemblaggio dell'involucro nucleare; agisce sia come repellente cromosomico durante la mitosi iniziale sia come attrattore cromosomico durante la mitosi tardiva. Riferimenti correlati: PMID:27362226 PMID:32879492 PMID:35513709
• Durante la mitosi iniziale, si rilocalizza sulla superficie dei cromosomi e forma estese strutture a pennello che creano una barriera sterica e di carica elettrostatica, funzionando come tensioattivo per prevenire l'aggregazione cromosomica e consentire la motilità indipendente. Riferimenti correlati: PMID:27362226
• Durante l'anafase, le strutture a pennello collassano e Ki-67 passa a funzionare come attrattore cromosomico: la defosforilazione espone una regione basica, che guida la separazione di fase liquida-liquida dipendente dall'RNA per raggruppare i cromosomi ed escludere le particelle grandi dal nucleo nascente. Riferimenti correlati: PMID:32879492 PMID:39153474 PMID:28935370
• Si lega al DNA con preferenza per le sequenze superavvolte e ricche di AT, contribuendo potenzialmente all'organizzazione della cromatina. Riferimenti correlati: PMID:10878551 PMID:24867636
• Si localizza su cromosomi, nucleo e nucleolo durante il ciclo cellulare.
• La proteina subisce acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, processi che regolano la sua localizzazione dinamica e la sua funzione.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Per il western blotting, Ki-67 è una proteina ad alto peso molecolare (~359 kDa); utilizzare un gel a bassa percentuale (ad es. SDS-PAGE al 6%) e tempi di trasferimento prolungati per garantire una rilevazione efficiente.
• Validare l'anticorpo nel vostro sistema sperimentale specifico, poiché l'espressione di Ki-67 è strettamente dipendente dal ciclo cellulare e può variare tra i tipi cellulari e gli stati di proliferazione.
• Per sezioni IHC in paraffina, sono raccomandati metodi standard di recupero dell'antigene (indotti dal calore, pH 6 o 9); è prevista colorazione nucleare o nucleolare nelle cellule in proliferazione.
• L'immunogeno (aa 1200-1300) mappa sulla regione C-terminale di Ki67 umano; considerare l'allineamento della sequenza se si intende verificare la reattività crociata con altre specie, poiché l'anticorpo può riconoscere epitopi conservati.

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