Anticorpo policlonale coniglio anti-KRAS convalidato KO per WB, IF/ICC, ELISA - P01116

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione KRAS

• KRAS (GTPasi KRas), noto anche come K-Ras 2, Ki-Ras, c-K-ras e c-Ki-ras, è codificato dal gene KRAS (KRAS2, RASK2). Vengono generate multiple isoforme proteiche attraverso splicing alternativo.
• Funziona come trasduttore di segnale nella via di segnalazione Ras-MAPK, regolando la proliferazione cellulare e la sopravvivenza (PubMed:22711838, PubMed:23698361). Riferimenti correlati: PMID:22711838, PMID:23698361
• KRAS lega GDP/GTP e possiede attività GTPasi intrinseca, ciclando tra stati attivi e inattivi (PubMed:20949621, PubMed:39809765). Riferimenti correlati: PMID:20949621, PMID:39809765
• Nelle cellule del cancro colorettale, KRAS contribuisce all'oncogenesi inducendo il silenziamento trascrizionale dipendente da ZNF304 dei geni soppressori del tumore (PubMed:24623306). Riferimenti correlati: PMID:24623306
• La proteina è riconosciuta dall'adattatore LZTR1, portando alla sua ubiquitinazione e degradazione tramite un complesso ligasi E3 ubiquitina-proteina BCR (BTB-CUL3-RBX1) (PubMed:40934300). Riferimenti correlati: PMID:40934300
• A livello subcellulare, KRAS è associato alla membrana cellulare, al sistema delle membrane endoplasmatiche e al citoplasma.
• A livello proteico, KRAS è espresso in tutto l'epidermide, con debole espressione nello strato corneo e nel derma.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, metilazione, prenilazione, palmitoilazione e ubiquitinazione, che regolano la sua localizzazione e funzione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 30–188 all'interno del dominio GTPasi conservato; la reattività incrociata con topo e ratto è coerente con l'alta identità di sequenza in questa regione. Se si testano specie aggiuntive, allineare le sequenze in anticipo.
• Per il western blotting, prevedere una banda intorno a 22 kDa. Utilizzare lisati cellulari convalidati KO come controllo negativo per confermare la specificità della banda e titolare l'anticorpo per ottimali rapporti segnale-rumore nel sistema.
• In immunofluorescenza/immunocitochimica, KRAS si localizza alle membrane e al citoplasma; ottimizzare i passaggi di fissazione e permeabilizzazione. Includere linee cellulari KO per verificare la specificità della colorazione.
• Per ELISA, convalidare l'anticorpo nelle condizioni specifiche del saggio, poiché le prestazioni possono variare con i metodi di rivestimento e rilevamento.

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